单克隆抗体的制备过程知识点题库

动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）

A . 动物细胞培养 B . 动物细胞融合 C . 单克隆抗体 D . 胚胎、核移植

动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（　）

A . 动物细胞培养　 B . 动物细胞融合 C . 单克隆杭体 D . 胚胎、核移植

下列有关生物工程及产品的说法错误的是（）

A . “生物导弹”中具导向作用的是单克隆抗体 B . 植物体细胞杂交和动物细胞培养技术中都要用到酶 C . 可以利用植物的茎尖或根尖通过植物组织培养技术得到抗毒苗 D . 发酵工程生产的食用色素、四环素、胰岛素都是微生物的次级代谢产物

下列有关细胞工程的叙述，正确的是（　　）

A . 生根培养基中生长素的含量应少于细胞分裂素 B . 动物细胞培养液中需添加胰蛋白酶和胶原蛋白酶 C . 单一抗体检测能筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞 D . 用酒精对植物组织培养的材料表面消毒需要长时间浸润

如图是通过动物纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究．据图回答相关问题．

（1）上图单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的和两大技术．
（2）过程①类似于植物组织培养技术中的核心步骤过程，过程②的实质是．
（3） Y、Z细胞的名称分别是、．
（4）过程③诱导细胞融合的生物因素是，细胞融合后还需要用培养基筛选获得Z细胞．
（5） Z细胞还需经过体外克隆化培养和才能获得大量产生所需抗体的细胞．体外培养Z细胞时，培养液中通常加入等天然成分，将其置于95%空气加5%CO₂的气体环境中，CO₂的作用是．
（6）经过上述过程获得的单克隆抗体的优点是．

如图是科学家新研发的制备单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是（）

A . 该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术 B . 经酶A处理后的Ⅰ与质粒具有相同的黏性末端 C . 若供体DNA提供了prG基因（无限增殖调控基因），则该过程中的Ⅱ是已免疫的B细胞 D . 通过检测和筛选得到的Ⅲ细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体

如图中的供体DNA中含有无限增殖调控基因，该基因能激发动物细胞的分裂，图示是利用该基因制备新型单克隆抗体的过程，相关叙述正确的是（）

A . 经酶A处理后Ⅰ与质粒具有相同的黏性末端 B . 酶B是连接氢键和磷酸二酯键 C . 载体必须具有目的基因 D . 将目的基因导入动物细胞最常用的方法是农杆菌转化法

科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖的调控基因（prC），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答以下问题：

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导剂是．若用骨髓瘤细胞与已免疫B细胞融合实验完成后，融合体系中除含杂交瘤细胞、B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞外，还有，体系中出现多种类型细胞的原因是．
（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示．请回答下列问题：
对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是；题目中Ⅱ所指的细胞是，Ⅲ所指的细胞具有的特点是．

下列关于细胞工程的叙述，错误的是（）

A . PEG可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B . 去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶来处理 C . 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D . 甲、乙两种二倍体植物体细胞杂交，获得的杂种植株后代依然为二倍体

下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述，错误的是( )

A . 单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞 B . 单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体 C . 筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞运用了抗原一抗体特异性反应原理 D . 单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点

某实验室做了下图所示的实验研究。下列相关叙述中正确的是（）

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A . 与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低 B . 单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外 C . 每个Y细胞只产生一种抗体，故过程④不需进行筛选 D . 过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程

（1）如图是以鲜葡萄汁为原料，制作葡萄酒和葡萄醋的过程，回答下列问题：

Ⅰ.若直接用洗净的红葡萄制作果酒，最后得到的葡萄酒呈红色，这是由于造成的，乙过程中使用的微生物是，制作葡萄醋需要向发酵罐提供。

Ⅱ.乙中使用的微生物可以从食醋中分离纯化获得，操作如下：

①配制培养基。

②灭菌。

③接种。接种时应在酒精灯附近进行，其目的是。通常法常用于对活菌进行计数，但其最终的统计结果却往往小于样液中的活菌数。

④培养。

Ⅲ.某研究小组发现一棵葡萄树具有抗虫抗旱的性状，欲用植物组织培养技术大规模繁殖具有该性状的幼苗，从而提高葡萄产量。接种前，需要对外植体进行消毒，先用浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗。实验过程中，愈伤组织在（A.LB培养基 B.MS培养基+适宜浓度NAA C.MS 培养基+适宜浓度BA D.MS培养基+适宜浓度BA+极少量的NAA）诱导分化成丛状苗，再转入生根培养基，形成完整植株。
（2）近日根据最新发表的RNA序列分析显示，正在爆发的武汉新型冠状病毒的细胞表面受体是ACE2，与SARS病毒的细胞表面受体一样。下图是设想以小鼠为对象进行的单克隆抗体制备过程示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞，HAT培养基中最终只有杂交瘤细胞可以生长繁殖，请回答以下问题：

Ⅰ.过程1需给小鼠注射特定，以刺激小鼠产生相应抗体的B淋巴细胞。

Ⅱ.过程2中常用的生物诱导剂是。仅考虑细胞两两融合，融合形成的每种细胞染色体组数（（选填“相同”或“不同”）。

Ⅲ.过程3是抗体检测及阳性细胞的过程，整个抗体制备过程要进行次检测。

Ⅳ.单克隆抗体制备过程运用了和的动物细胞工程技术手段。产生的抗体比一般抗血清优越得多，原因。可为新型冠状病毒抗体研发提供重要的研发思路。

下列关于淋巴细胞的叙述正确的是（）

A . 淋巴细胞、巨噬细胞来自单核细胞，均可参与免疫应答 B . 效应细胞毒性T细胞在胸腺中由淋巴干细胞分裂分化产生 C . 单克隆制备过程中没有用到T淋巴细胞 D . 淋巴细胞表面均有不同抗原的受体

科学家想通过制备单克隆抗体的方法来治疗和预防新型冠状病毒肺炎。回答下列问题：

（1）在疫情期间，采用康复者恢复期的血浆进行治疗在临床上有较好的效果，由这种方法获取的抗体不仅产量低而且纯度低，而单克隆抗体的突出优点在于它并能大量制备。
（2）单克隆抗体的制备过程中，运用了细胞工程中的和技术，将新型冠状病毒的抗原蛋白注入小鼠的目的是。
（3）在单克隆抗体的制备过程中进行了两次筛选，进行第二次筛选的目的是。
（4）利用小鼠制备的单克隆抗体在临床上不能直接用于人体，还需要对抗体进行人源化，即对鼠源单克隆抗体进行改造，使其大部分氨基酸序列为人源序列所替代，该过程的意义是。

回答下列（1）（2）小题：

（1）桑葚含有丰富的活性蛋白、维生素和矿物质等成分，桑葚酒是用桑葚汁酿造的酒，具有较高的营养成分和养生价值。回答有关问题：
Ⅰ.制作桑葚汁：为提高出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加入处理，将果胶彻底水解为半乳糖醛酸：二是处理，使细胞的蛋白质凝固，改变细胞的半透性，从而提高出汁率。若想获得无色澄清的桑葚汁，需要再进行处理。

Ⅱ.生产桑葚酒：在工业生产中为了实现酵母菌与产物的分离和多次利用，可将酵母菌和海藻酸钠均匀混合，经CaCl₂处理形成凝胶颗粒，酵母细胞被固定在内部。然后用无菌水洗涤，目的是。这种固定化方法为（A．吸附法B．包埋法C．交联法D．共价偶联法）。发酵液中可添加适量，以获得酒精含量较高的桑葚酒。发酵完毕后过滤，上清液即为果酒，可用法取出。除温度、pH等环境条件外，影响桑葚酒风味的因素有（答出两种即可）。
（2）诺如病毒是一类引起急性非细菌性胃肠炎的RNA病毒，它的主要结构蛋白的P区域包含受体结合区和主要抗原位点。通过大肠杆菌表达P区域可形成P颗粒，P颗粒的抗原性及受体结合功能与天然病毒极为相似，可以用于制备快速检测诺如病毒的单克隆抗体，基本过程如下：
Ⅰ.获取P颗粒基因：提取诺如病毒的RNA，以相应的RNA片段为模板，利用酶合成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，从而快速获得大量P颗粒基因。

Ⅱ.形成重组DNA分子：该过程常用不同的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，目的是防止目的基因和载体的自身环化及。

Ⅲ.重组DNMA分子导入受体细胞及筛选：用处理大肠杆菌，可提高转化效率，重组质粒通常需具有目的基因、复制起点、转录起始位点、及标记基因等功能序列，从而保证其正常复制、表达及便于后续筛选。

Ⅳ.P颗粒基因的表达：筛选过的大肠杆菌表达P颗粒基因，分离提取P颗粒。

Ⅴ.单克隆抗体的制备与检测：将P颗粒注射到小鼠体内，取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤通过化学物质诱导细胞融合。接着进行两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞：第二次筛选出。单克隆抗体可用于诊断是否感染诺如病毒，这种诊断运用了杂交技术，单克隆抗体的优点是。

回答下列（1）、（2）有关的生物学问题：

（1）生物发酵是生物技术实践活动中的一项重要技术。某校同学利用生物发酵技术开展了以下活动：

Ⅰ.甲组同学利用如图装置制作蓝莓酒：发酵开始时，酵母菌的会使发酵瓶内出现负压。当发酵瓶中停止出现气泡，表示发酵完毕。静置一段时间后，上清液即为果酒，可用法取出。
Ⅱ.乙组同学使用甲组获得的蓝莓酒制作蓝莓醋：发酵前用加入了蛋白胨、酵母提取物和的液体培养基对醋化醋杆菌进行。若他们也想利用图装置发酵果醋，需进行的改变是（说明A、B管变化）。
Ⅲ.丙组同学用萝卜制作泡菜：泡菜制作中起作用的微生物主要是。若要测定泡菜中的亚硝酸盐含量，可用法测定，而用红萝卜腌制的泡菜则不能使用该方法定量测定亚硝酸盐的含量，原因是。
（2）如图1为普通抗癌药物和单克隆抗体药物作用特点，图2为我国科学家设计的单克隆抗体偶联药物（ADC）作用机制，请分析回答下列问题：

Ⅰ.治疗癌症的生物导弹由组成，分子标靶治疗药物主要依靠细胞膜上的区分正常细胞和癌细胞，其中的单克隆抗体所起的作用是。
Ⅱ.由图2可以看出，携带药物的单克隆抗体偶联药物（ADC）进入细胞的方式为，该过程消耗的能量直接由提供。药物能引起癌细胞凋亡，细胞凋亡是指。
Ⅲ.单克隆抗体制备中至少需要经过次细胞筛选，结合图1、图2可以看出，与常规抗癌药物相比，利用单克隆抗体制备的生物导弹治疗癌症具有的明显优点是。

用单克隆抗体治疗传染性疾病获评为Science“2021年度十大突破”之一。下图表示单克隆抗体的制备过程。下列有关叙述错误的是（）

A . 过程①的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞 B . 过程②可用聚乙二醇或灭活病毒来诱导细胞融合 C . 过程③孔板的每一个孔中应尽量多接种几个细胞 D . 过程③需提供一定浓度的CO₂ ，以维持培养液pH

如图为单克隆抗体制备流程示意图。

（1）技术是单克隆抗体技术的基础，此过程还用到的重要技术是。
（2）细胞融合是随机的过程，使用HAT培养基进行培养的结果是。
（3）在多孔细胞培养板上选出的杂交瘤细胞具备特点。
（4）给小鼠多次注射特定抗原的目的是要得到。

现代生物工程技术推动力医药学、免疫学和生态学的发展，依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题：

（1）科学家将生长激素基因与的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的中，获得转基因动物，再利用技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，来生产生长激素，用于治疗矮小症。
（2）单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓细胞进行融合，再用特定的培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行培养和抗体检测，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是。
（3）哺乳动物胚胎干细胞简称细胞，该细胞在细胞上或添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。

幽门螺杆菌（Hp）是一种革兰氏阴性微需氧菌，一般定植在胃黏膜上皮细胞表面，能产生高活性的脲酶，可分解尿素产生NH₃和CO₂ ，以保护Hp免受胃酸和胃蛋白酶的侵袭。Hp是引起慢性胃炎、胃溃疡、胃癌的重要因素，Hp会因为胃黏膜上皮细胞的快速更新、脱落而脱落，随粪便排出。临床上可以通过¹³C或¹⁴C呼气试验和检测粪便抗原等方法判断感染情况。回答下列问题：

（1） ¹⁴C呼气试验检测是否感染Hp时，口服含¹⁴C的尿素胶囊，短时间内用特定仪器检测呼出气体中含¹⁴C的含量，其原理是利用了酶的高效性和性。¹⁴C检测无辐射，更适用于儿童和的检测。粪便抗原的检测原理是，并利用对抗体进行标记或显色。
（2）用于粪便抗原检测的单克隆抗体，在制备过程中涉及的细胞工程技术主要有动物细胞融合和。利用灭活病毒诱导细胞融合的原理是利用病毒表面含有的糖蛋白的作用和酶的催化作用，促使细胞互相凝集，引起细胞膜的蛋白质分子和磷脂分子重新排布，细胞发生融合。
（3）对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，最常用的是法，即稀释到每mL培养液中只有3~10个细胞，然后在多孔细胞培养板的每个孔内加入细胞稀释液0.1mL，使绝大多数孔中的细胞数不超过个，从而实现单克隆培养。

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