单克隆抗体的制备过程知识点题库

某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料，通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为( )

A . 小鼠体内只有一种抗体 B . 小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C . B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D . 可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞

下列对生物技术的理解，合理的是（）

A . 基因工程的核心是将目的基因导入受体细胞 B . 单克隆抗体是骨髓瘤细胞分泌的 C . 用胚胎分割技术可获得性别不同的双胞胎 D . 蛋白质工程可制造出自然界原本不存在的蛋白质

下列对细胞全能性的表述正确的是

A . 非离体植物细胞能够表现全能性 B . 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C . 单克隆抗体的制备原理是细胞的全能性 D . 花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现

下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．

（1）过程①和②得到的Y细胞称为．得到的单克隆抗体最主要的优点是．

（2）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构是否相同？．为什么？

（3）在基因表达载体中，启动子的作用是识别和结合的部位，驱动V1基因的

（4）质粒上的标记基因的作用是．

（5）过程④要用到的主要酶是

科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体．下列相关叙述中，符合实际的是（）

①常从小鼠的肝脏中获取相应的浆细胞

②需经过细胞融合和细胞培养过程，且可从体外培养液和小鼠腹腔中提取单克隆抗体

③单克隆抗体特异性强、灵敏度高，既可单独作药物，也可作诊断试剂和药物载体

④单克隆抗体的制备运用了细胞生物学、免疫学的原理或方法．

A . 正确的有二项，分别是①④ B . 正确的有二项，分别是②③ C . 错误的有二项，分别是①③ D . 错误的有二项，分别是①②

PD-1是由PD-1基因(凋亡基因)指导合成的位于淋巴T细胞表面的蛋白质；PD-L1是一些肿瘤细胞表面的蛋白质。PD-1和PD-L1之间相互作用，促进T细胞凋亡，则癌细胞可逃脱免疫系统的追杀。使用PD-1抗体治疗癌症取得很好的效果。就相关信息回答以下问题：

（1）利用基因工程技术生产PD-1，构建的基因表达载体必需具有PD-1基因以及。对PD-1进行检测采用的是法。
（2）如果用小白鼠来生产纯度高、特异性强的PD-1抗体，可以将注射到小白鼠体内，然后从其脾脏中获得细胞并与小白鼠的细胞在作用下形成杂交瘤细胞。最终选择的杂交瘤细胞进行体内或体外培养。
（3）根据上面信息，写出PD-1抗体治疗癌症的机理：。

下列技术或方法与原理相符的是（）

A . 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B . 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C . 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D . 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组

下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程。请据图回答有关问题:

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（1）在受体细胞的培养过程中,培养液与植物组织培养的培养基相比,特有的天然成分是。
（2）图中X细胞一般指,与植物体细胞杂交相比,诱导X细胞和Y细胞融合还可采用。
（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选,首先用特定的选择性培养基筛选出,还需进行克隆化培养和专一抗体检测，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,选出符合要求的细胞后,可在体外条件下或注射到进行增殖培养。
（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者,这种诊断运用了抗原-抗体杂交技术,这体现了单克隆抗体、的特性。

阅读下列资料，回答相关问题：

资料1：利用小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。

资料2：葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10~12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。

资料3：巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗容易受螟虫的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。

（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞。单克隆抗体最主要的优点有。
（2）资料2中提到的生物技术属于工程的范畴。在该实例中，直接需要操作的是（填“肽链结构”“蛋白质空间结构”或“基因结构”）。
（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，其核心步骤是。

牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是

A . H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B . 应选用原肠胚做雌雄鉴别 C . 鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D . 用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体

杂交瘤细胞制备示意图如下。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT^－），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。据图回答下列问题：

（1）细胞融合的原理是，诱导动物细胞融合特有的方法是。
（2）选择免疫B细胞是因为其，且使杂交瘤细胞能在HAT培养液中生存。杂交瘤细胞制备利用了骨髓瘤细胞的特点。杂交瘤细胞具备两种细胞的优势。
（3）利用杂交瘤细胞生产抗体，还需要进一步的多次筛选，原因是。
（4）将最终获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到内增殖，一段时间后从相应的材料中获取抗体。

某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是(　　)

A . 过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变 B . 丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体 C . 过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养 D . 过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇

回答下列（一）、（二）小题

（1）回答与果酒和果醋制作有关的问题：

Ⅰ.欲纯化野生酵母，最简单的分离方法是；醋化醋杆菌的培养基由蛋白胨、酵母提取物和组成。

Ⅱ.培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌法，影响其灭菌效果的因素有温度、压力、时间以及等；灭菌结束后，待高压锅或灭菌锅时打开锅盖。

Ⅲ.用铝箔将甲、乙、丙瓶上口盖住的原因是。

Ⅳ.将醋化醋杆菌培养物和适量的酒—水混合物混匀后，调pH至7.0，再与的锯末等吸附物混匀，进行发酵。乙瓶中（有/无）二氧化碳产生。

Ⅴ.若用果汁酿造果酒，可添加使果胶彻底分解成半乳糖醛酸。
（2）猪繁殖与呼吸综合症是一种严重威胁我国养猪业发展的传染病，由PRRSV病毒引起。科学家制备出PRRSV-GP3蛋白的单克隆抗体可对该病进行诊断和治疗，制备过程如图所示。请回答下列问题：

Ⅰ.在GP3蛋白的单克隆抗体制备过程中，需要用纯化的GP3蛋白对小鼠进行多次免疫，若检测到小鼠血清中出现，说明小鼠已经产生了相应的体液免疫过程，可以从小鼠内提取细胞甲。

Ⅱ.①过程为，常用于介导的化学试剂为。

Ⅲ.第二次筛选前，需先对细胞丙进行培养，再通过（填方法）筛选出细胞丁。

Ⅳ.单抗比一般抗血清优越得多，原因是。

“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的是（）

①基因工程中用同种限制酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得的产物筛选后导入受体细胞

②为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养

③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞

④单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞

A . ①② B . ②③ C . ③④ D . ①④

（1）柚子为芸香科柑橘属植物，果肉浓甜，果皮肥厚，人们不仅可以用果肉制备果酒，还可以从抽皮中提取果胶。请回答以下问题：
Ⅰ.果酒制作的菌种是酵母菌，在分离和纯化酵母菌时对培养基要采用灭菌，在用液体培养基扩大培养酵母菌时，需要不断振荡和搅拌，其目的是。

Ⅱ.制备柚子果酒时，先要对柚子榨汁并用调整甜度，然后将调整好甜度的柚子果汁放90℃恒温水浴锅内。若获得的发酵液中酒精浓度较低，而酵母菌的数量却很多，则导致该结果出现的原因可能是。

Ⅲ.若利用柚子果皮制取果胶，需预先将柚子果皮在沸水中浸泡一段时间，目的是。研磨、萃取获得果胶初提物，并用无水乙醇处理，使其，获得果胶干制品。

Ⅳ.果胶能与3，5-二甲苯酚发生反应，产生红色物质。研究人员利用果胶的这一性质，可通过测定溶液的来进行果胶含量的测定。测定前，需用活性炭对果胶进行处理。测定时，标准液和样本液测定时需保证（答2点即可）等一致。
（2）现代生物科技是当前的科研热门，请回答下列问题。
Ⅰ.制备抗虫棉时，利用了Ti质粒，需要将抗虫基因整合到Ti质粒的内部，原因是。

Ⅱ.在单克隆抗体制备过程中，利用筛选出浓度为10个/mL的杂交瘤细胞，则需要将mL杂交瘤细胞悬浮液加入到多孔培养板进行克隆培养，并进一步进行抗体检验。抗体检验的目的是。

Ⅲ.不同植物的原生质体融合技术（填属于或不属于）植物细胞工程。而胚胎干细胞培养（填属于或不属于）胚胎工程范畴。哺乳动物胚胎体外培养后需要进行胚胎移植的原因是。

中国科研团队从痊愈的新冠肺炎患者体内分离出几十种抗体基因，通过工程菌表达，筛选出的CB6单克隆抗体能抢先与新冠病毒刺突蛋白（S蛋白）结合，从而阻断病毒与宿主细胞结合，使其无法感染正常细胞。下列说法错误的是（）

A . 痊愈的新冠肺炎患者的血清可用于新冠肺炎治疗 B . 该团队获得CB6单克隆抗体的过程应用了基因工程和发酵工程技术 C . 利用S蛋白研发疫苗可预防新冠肺炎 D . CB6抗体特异性的改变了S蛋白在宿主细胞上的结合位点

CEA癌胚抗原是在1965年首先从结肠癌和胚胎组织中提取出的一种肿瘤相关抗原，是一种酸性糖蛋白。常用CEA抗体检测血清中的CEA含量，进行相关疾病的临床诊断。下图是CEA单克隆抗体的制备流程示意图，请据图回答下列问题：

（1） ①表示从cDNA文库中扩增获取大量目的基因的过程，那么A和人体内的CEA基因的结构上的区别是。制备重组质粒过程时，为确保目的基因与质粒准确连接，应采用图示中的酶的切割位点。过程②常用法。
（2）诱导融合成为杂交瘤细胞时，常用的诱导因素有（写出三种）。细胞培养过程中需要的气体条件是。
（3） ③表示过程，获得的C细胞的特点是。
（4）应用获得的单克隆抗体搭载抗癌药物制成“生物导弹”治疗癌症，具有的优点是。

某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的（　　）

	植物细胞工程	动物细胞工程
技术手段	植物组织培养，植物体细胞杂交	动物细胞培养融合，单克隆抗体的制备
特殊处理	机械法去除细胞壁	胰蛋白酶处理，制成细胞悬液
融合方法	物理方法、化学方法	物理方法、化学方法、生物方法
典型应用	人工种子、杂种植株	单克隆抗体的制备
培养液区别	生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化	动物血清不可缺少

A . 1 B . 2 C . 3 D . 4

下图为动物细胞工程操作的流程图。请据图分析回答：

（1）将动物组织中的细胞分散开来获得单个细胞A和B通常用来处理。将A、B细胞融合形成C细胞的①常用的方法有（至少答出三种）。
（2）如果该图表示抗乙肝病毒的单克隆抗体的制备过程，A细胞是骨髓瘤细胞，则B细胞是从小鼠体内获得的，在获得该细胞之前，需要向小鼠注射。获得C细胞需要经过二次筛选，最终得到。
（3）如果该图表示克隆羊的培育过程，①过程中涉及的生物技术有（写出两种即可）。如果D表示所获得的克隆动物，则②过程中涉及的生物技术有。

CD47 是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的 CD47 含量比正常细胞高 1.6-5 倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗 CD47 的单克隆抗体可以解除CD47 对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验：

下列叙述正确的是（）

A . 过程②中可用的诱导因素有灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）、紫外线照射 B . 在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后均可获得大量的抗CD47 的单克隆抗体 C . 对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体 D . 过程①中给实验小鼠注射的CD47 是能与抗 CD47 的单克隆抗体特异性结合的抗原

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