测定某种微生物的数量知识点题库

下列关于微生物计数方法的叙述正确的是（　　）

①用血球计数板可以对细菌或酵母菌进行计数；

②用平板划线法可以得到单菌落，因而可以对微生物计数；

③用稀释涂布法可以得到单菌落，因而可以对微生物计数；

④用稀释涂布法接种后，经培养得到的个体数量即是待测样品的个体数量．

A . ①④ B . ②③ C . ①③ D . ①②③

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养．
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数，若要测定其活菌数量，可选用法进行计数．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验．

生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物．供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染．因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的．我国生活饮用水水质标准（GB5749﹣85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L．

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为．
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？
（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为．
（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用法灭菌，（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染．
（5）
如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（）

A . 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B . 步骤②接种环火焰上灼烧后迅速沾取菌液后平板划线 C . 步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D . 步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数
（6）下列有关微生物培养的叙述错误的是　（）

A . 在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌 B . 分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源 C . 测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数 D . 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用．

某同学在稀释倍数为10⁵的培养基中得平板上的平均菌落数为90，涂平板用的稀释液的体积为0.1mL，则每克样品中的菌落数为（）

A . 9×10⁸ B . 9×10⁷ C . 9×10⁵ D . 9×10⁶

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物，某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）

A . 使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落 B . 如果要测定②中的活细菌数量，常采用稀释涂布平板法 C . 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 D . 微生物培养前，需对培养基和培养皿进行消毒处理

幽门螺旋菌是一种螺旋形的革兰氏阴性菌（革兰氏阴性菌对万古霉素、两性霉素B等不敏感），感染后可引起胃炎、消化道溃疡等疾病，已知幽门螺旋菌具有较强活性的脲酶（脲酶能将尿素分解为氨和二氧化碳或碳酸铵）。目前幽门螺旋菌是能够分离纯化培养的少数胃微生物之一。

（1）为从胃炎患者的胃粘膜提取稀释液中分离得到幽门螺旋菌，应将稀释液样品接种在以为唯一氮源的（填“固体”或“液体”）培养基上，以法接种后置于培养箱中培养。
（2）如欲检测是否存在幽门螺旋菌，可向培养基中添加，在培养过程中如出现红色环带的菌落，表明该菌落为幽门螺旋菌菌落。
（3）现将上述实验分离得到的幽门螺旋菌进行扩大培养，采用布式肉汤基础培养液进行培养，培养液中需加入用紫外线处理1小时的6%马血清和混合抗生素（包括万古霉素、两性霉素B等）。使用混合抗生素的目的是，选择紫外线而不用高压蒸汽灭菌的方法处理马血清的原因是。
（4）若利用活菌计数法统计幽门螺旋菌的数量，计得的微生物数量往往比实际数，原因是。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐等配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。请分析回答下列问题：

（1）该培养基只允许分解化合物A的细菌生长，这种培养基称为培养基。该培养基在接种前应该用法灭菌。
（2）对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，常采用的接种方法是，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是。
（3）将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49，据此可得出每升水样中的活菌数为，实际上每升溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为。
（4）若用固定化酶技术固定目的菌中催化化合物A降解的酶，和一般酶制剂相比，其优点是，且利于产物的纯化；固定化目的菌细胞常用法固定化。

[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜是伞形科的两年生草本植物，因其营养丰富且老少皆宜，成为了人们餐桌上一种重要的食材，回答下列有关问题：

（1）胡萝卜可生吃，可炖煮，还可以制作成泡菜，泡菜发酵过程中会产生亚硝酸盐，因此食用前需要检测泡菜中亚硝酸盐的含量而避免中毒，测定亚硝酸盐含量的常用方法是。制作泡菜时，若泡菜坛未密封好，则会因杂菌污染而导致制作失败，为探明导致泡菜制作失败的微生物种类，实验小组将被污染的泡菜液接种到培养基上进行培养。常用于统计活菌数目的接种方法是，使用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低，原因是。统计微生物数目的方法除利用菌落进行活菌计数外，还有法。
（2）胡萝卜中含有大量的胡萝卜素，天然胡萝卜素具有使癌细胞恢复成正常细胞的功能，根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，常采用法提取胡萝卜素。
（3）芫荽，又名香菜，也是伞形科的一种常见食材，香菜之所以具有香气，是因为其含有挥发性精油，精油在日常生活中有着广泛的应用，不同精油的制备过程不同，这与其原料的性质等有关，柚皮在水中蒸馏时容易焦糊，宜采用法提取柚皮精油；玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，常选择法进行提取。

下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是（）

A . 采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数 B . 当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C . 为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D . 在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

研究表明艾叶煎液具有抗细菌和抗真菌的作用。为研究艾叶煎液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的抑菌能力，科研人员将若干浸泡了艾叶煎液的无菌圆纸片贴于分别培养有三种菌的平板上，然后将平板置于恒温培养箱中进行培养，一段时间后，测量抑菌圈直径并求平均值，结果如下表：

	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	黑曲霉菌
抑菌圈直径/mm	6.38	7.65	0

请回答下列问题。

（1）可用法将菌液接种在固体培养基上，使菌体均匀分布，该种接种方法还可以用来计数，但统计的菌落数往往会比活菌的实际数目（填“多”或“少”），原因是。
（2）置于培养箱中培养的平板需要（填“倒置”或“正置”），这样做的目的是。使用后的培养基在丢弃前需要经过处理。
（3）实验结果说明艾叶煎液对的抑制作用最明显。通过抑菌圈的直径可以判断艾叶煎液抑菌活性的高低的原理是。为使实验更具有说服力，应如何设置对照组? 。
（4）近些年人们发现了抗药性极强的金黄色葡萄球菌，有人认为是滥用抗生素诱发了基因突变所致，该观点（填“正确”或“不正确”），原因是。

《Live Science》曾撰文指出手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，最近国内微博、微信又对此大量传播，央视和北京卫视通过某科研单位进行了实验调查，下图为实验调查结果。请分析回答下列相关问题：

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（1）为了防止杂菌污染，在实验前需要对用于培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌，常见的灭菌方法有。图中两电视台所采用的接种方法均为稀释涂布平板法，该方法还常用来统计样品中活菌的数目，但往往统计值比实际值偏低，原因是。
（2）经研究发现手机屏上分布有大量微生物，其中有大家所熟知的大肠杆菌、酵母菌等，区别二者的主要依据是。通过进一步检查发现，两组实验操作步骤均正确且完全一致，但报道结果却截然不同，你认为最可能的原因是：。
（3）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10m1菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10³的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为个/cm²。
（4）已知金黄色葡萄球菌的最适生长温度为37℃，并且有高度的耐盐性，可以在10%~15%NaCl肉汤培养基中生长，某同学想快速培养大量的金黄色葡萄球菌应该如何操作？。该同学分离得到金黄色葡萄球菌后，将其接种到试管的固体斜面培养基上进行临时保存，该保存方法的缺点是。

[选修1:生物技术实践]

为解决生活污水中油脂对环境造成的污染。科研人员要从污水中筛选出分解油脂能力最强的微生物。请分析回答：

（1）首先取生活污水，与特定液体培养基混合培养。取生活污水的目的是，该液体培养基有什么特别之处？。这一轮培养的目的是。
（2）图甲和图乙所代表的方法中能对微生物进行分离和计数的是法。用该方法统计样本菌落数时（“需要”或“不需要”）设置空白对照组，原因是。
（3）科研人员按图乙方法培养了3个平板，一段时间后得到的菌落数依次为485、501、523，出现这样的实验结果，其可能的原因是。
（4）从实验结果来看，确定分解油脂能力最强的微生物的方法是。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂HPO₄	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于。
（2）若根据用途划分，该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？，并用作为指示剂。
（3）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行；操作者的双手需要进行清洗和。
（4）图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：和，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外，测定微生物数目的另一种方法是。
（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有。

A . 制作果酒 B . 由果酒制作果醋 C . 制作泡菜 D . 制作腐乳

随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌，设计了如图所示的流程。回答下列问题：

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（1）土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供的四大营养物质分别是碳源、。
（2）通过相关实验选择较合适的土壤样品时，该实验的自变量是，选择最合适土壤样品的指标是。
（3）图中“甲”指的是，使用的是（填“固体”或“液体”）培养基，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度。
（4）分离纯化聚丙烯纤维降解菌时，为了使培养皿上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的接种方法是，采用该方法的原因是。
（5）将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基以聚丙烯纤维为唯一碳源，并加入了能与之结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么，选择的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。

研究发现，因餐厨垃圾水分和有机物含量丰富、极易腐败、发臭，包括大肠杆菌在内的细菌会大量繁殖，严重影响城市环境及资源利用。研究人员研究了不同保存方式对抑菌效果的影响，测定了各组大肠杆菌数量随保存时间的变化，具体结果如图所示（CFU/mL是每毫升检样所生长出来的细菌菌落总数）。下列说法正确的是（）

A . 大肠杆菌属于化能自养型生物，具有核糖体和细胞壁 B . 据图分析，直接厌氧保存组的保存方式抑菌效果最好 C . 乳酸菌的代谢产物可对大肠杆菌起到一定的抑制作用 D . 餐厨垃圾中大肠杆菌的数量是通过平板划线法测得的

嗜冷细菌在－15～20 ℃温度下最宜生长，其产生的大量胞外耐高温的脂肪酶和蛋白酶会分解脂肪和蛋白质，从而造成牛奶腐败变质。为测定某牛奶样品中嗜冷细菌的数目，某生物小组做了如图所示实验，下列有关说法错误的是（）

注：培养皿旁的数字代表菌落数目。

A . 牛奶样品中含有嗜冷细菌生长繁殖所需的所有营养成分 B . 估算1 mL牛奶样品中嗜冷细菌的活菌数为3.9×10⁵个 C . 刚挤出的鲜牛奶冷藏一段时间后进行高温杀菌处理，牛奶就不会腐败变质了 D . 可从嗜冷细菌中获得抗冻基因用于抗冻作物品种的培育

研究人员在对某湖泊生态系统研究后，绘制了该生态系统的食物网（图甲）和碳循环示意图（图乙），图中A，B，C，D表示生态系统的相关成分。请据甲、乙两图回答有关问题：

（1）乙图中，对物质循环起关键作用的生态系统的成分是和（填字母）。
（2）鲢鱼的粪便能被细菌和真菌分解，这种情况下细菌和真菌的能量直接源于第营养级。
（3）若河蚌从小球藻中获得的能量占比2/5，从水蚤中获得的能量为占比3/5，则河蚌增加10 g体重，最少需要小球藻。
（4）检验员用抽样检测方法检测每毫升水体中小球藻的数量：将ImL水样稀释100倍后，将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液滴于盖玻片边缘，使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。稍待片刻，待，将计数板放在载物台中央，在显微镜下观察、计数。已知血细胞计数板的规格为1mm×1mm×0.1mm，图1为其正面示意图，显微镜下观察到图2所示的图像。若计数得图2中每一中方格里小球藻平均数为5个，则该1 mL培养液中含小球藻约个。

下列有关实验的描述中，正确的有（）

①腐乳制作过程由多种微生物参与，其中毛霉起主要作用，因为毛霉能直接吸收豆腐中的蛋白质和脂肪

②显微镜直接计数法易计数活菌数目

③一个菌落的产生肯定是在固体培养基表面上单个细胞为中心形成的子细胞团

④纤维素分解菌鉴定时在培养基中加入酚红指示剂，如果指示剂变红则能初步鉴定

⑤用萃取方法提取胡萝卜素的过程使用水浴加热，目的是防止直接加热引起燃烧爆炸

⑥用纸层析法鉴定胡萝卜素的原理是滤纸对各种色素的吸附能力不同

A . 1项 B . 2项 C . 3项 D . 4项

产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：

（1）称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经梯度稀释后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在3个固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46、43、52个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌。根据该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，其原因是。
（2）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径的菌落、纯化后获得A、B两突变菌株。
（3）在筛选产脂肪酶酵母菌株的培养过程中，某同学认为应在培养基上接种样品后，还要用空白培养基做对照，他的设计目的是。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据下图分析，应选择菌株进行后续相关研究。

咔唑（含N有机物）是煤焦油中经济价值最高的成分之一，但其具有潜在致癌性，且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物，研究人员设计了下图所示的实验方案（①~④表示相应的标注操作过程）。回答下列问题：

（1）咔唑可以为降解咔唑的微生物的生长提供。实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用（填方法）进行灭菌。
（2）在过程④前，需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是。过程④后，平板培养基需要倒置，其目的是。
（3）实验中初步估测咔唑浓度为0.5g·L^-1的摇瓶中，细菌细胞数为1.5×10⁷个·mL^-l ，若每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证各个平板上长出的菌落数的平均值不超过150个，则至少应将摇瓶中的菌液稀释倍。
（4）在相同且适宜条件下进行上述“多瓶培养”操作，一段时间后检测各培养瓶中咔唑的浓度，可以初步确定的培养瓶中含有高效降解咔唑的微生物。

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