第2节基因工程的基本操作程序知识点题库

下列有关基因工程操作的正确顺序是
①目的基因的检测和表达 ②目的基因与运载体结合
③将目的基因导入受体细胞 ④提取目的基因

A . ①②③④ B . ④③②① C . ④②③① D . ③④②①

下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述正确的是

A . PCR过程中需要引物，是为了使DNA双链分开 B . PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步 C . PCR过程中DNA合成方向是3'到5' D . PCR过程中边解旋边复制

加拿大科学家通过转基因山羊已经生产出重组的人类丁酰胆碱酯酶，该酶可用于对抗生化武器．下图是转基因山羊的培育过程示意图，请据图回答问题（山羊为二倍体）：

（1）在上述操作中，目的基因是基因，将该基因导入受体细胞常用的方法是法．

（2）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或所进行的多种显微操作和处理技术．图中过程⑦所涉及的胚胎工程技术是

（3）从雌性山羊卵巢内获取的卵母细胞需要培养到期才能完成受精作用，为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性山羊体内注入激素．受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和

（4）要同时获得多只与此转基因山羊遗传物质相同的小羊，可对囊胚进行

请回答以下有关基因工程的问题．

（1）基因工程中切割DNA的工具酶是．DNA连接酶根据其来源不同，分为和
（2）利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便根据这一序列合成
（3）是基因工程的核心步骤．启动子是识别和结合的部位，它能驱动基因转录出mRNA．
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
（5）要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的方法是技术．

“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中错误的是（）

A . 单克隆抗体制备过程中，第二次筛选的细胞既能无限增殖又能产生特定抗体 B . 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞一定是都含有重组质粒 C . 在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异 D . 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选

转基因技术的应用使生物界产生了许多新的生物类型，完成了多种生物性状的定向改变，如利用转基因技术培育高血压大鼠，研究其致病机理及治疗药物的选择；将铁结合蛋白质导入高产水稻中，获得高产、含铁量高的水稻株系等．请回答下列问题：

（1）构建基因表达载体时需要的工具酶有，基因表达载体中标记基因的作用是．
（2）植物组织培养中，培养基中的和的比例影响细胞发育的方向．
（3）在转基因动物的培育过程中，将目的基因导入受精卵采用最多的方法是，体外培养受精卵时，培养液中提供CO₂的目的是．若将得到的胚胎进行分割，其操作过程中特别需要注意的问题是．
（4） PCR技术扩增目的基因的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在酶作用下进行延伸，如此重复循环多次，使目的基因的量呈形式扩增．PCR技术扩增目的基因的前提是．

埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别．

（1）以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全，其原因是．
（2）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒（EBO）．
（3）科研人员将GP蛋白基因通过（方法）导入牛受精卵中，可以通过技术从分子水平检测转基因是否培育成功．体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有和．
（4）为了从分泌乳汁中生产GP蛋白，在基因导入受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的．早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于时期的细胞进行检测．

【生物﹣﹣选修3：现代生物科技专题】

已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡．因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力．

回答下列问题：

（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的序列，据此可利用方法合成目的基因．获得丙中蛋白质的基因还可用、方法．
（2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用酶和．
（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗的危害．
（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子（填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因．

应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请回答下列有关生物工程的问题。

（1）基因工程中构建基因表达载体需要用到酶和DNA连接酶，DNA连接酶中，可连接DNA的两个末端。
（2）大肠杆菌PUC19质粒如图所示。
Lacz基因是PUC19质粒上重要的标记基因，其表达产物能水解X-gal，进而使大肠杆菌菌落呈蓝色。用EcoRl构建重组质粒，导入受体菌（不含LacZ基因和氨卡青霉素抗体基因）并进行检测。下列叙述不正确的是_____（单选）

A . 应用涂布法将受体菌群接种在培养基表面 B . 培养基中应含有氨卡青霉素和X-gal C . 挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌 D . 应挑取培养基表面的蓝色菌落进行扩大培养
（3）植物转基因技术中，最常用的导入目的基因的方法是，其中需要的运载体是，目的基因插入到该运载体的中，以便使植物细胞得以转化。这是植物和裸子植物常用的一种基因转化方法。
（4）动物基因工程中，一般把目的基因导入动物的细胞中。

回答下列关于基因工程的问题

2017年10月23日，中科院动物所联合中国农业大学的研究人员在 PNAS 发表论文，利用CRISPR/Cas9 技术，向猪的基因组内插入一个解耦联蛋白基因（UCP1），经过基因改造的猪瘦肉率显著提高，比正常猪脂肪少24%，抗寒能力也得到提高。图22是基因改造过程中涉及的相关限制酶，箭头表示酶切位点。表一显示几种限制酶的识别序列及切割位点。

（1）在基因工程中，将目的基因导入受体细胞所用的工具被称为。能将含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的是（多选）
A.质粒 B.动物病毒 C.噬菌体 D.植物病毒
（2）将 UCP1 基因插入质粒，可以只用同时酶切质粒与 UCP1 基因，也可以使用两种限制酶同时酶切质粒和 UCP1 基因，后一个方法的优点在于。
（3）图中的抗生素抗性基因的作用是，为了获取重组质粒，除了使用限制酶外，还需使用酶。
（4）科研人员通过法，将重组质粒导入猪的细胞中，然后将该细胞送入母体内，使其生长发育成转基因猪。该转基因猪与普通雄性个体交配，所产的后代不一定是瘦肉猪，原因是。

马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。

（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过和完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有。
（2）为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。

①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了法。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有和，还要用处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是，目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是；通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于水平的检测。

②该转基因马铃薯产生的配子中(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。

下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）

A . 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B . 质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 C . 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快 D . 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达

下列有关基因工程的说法，正确的是（）

A . 基因工程常用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和运载体 B . 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等 C . 基因工程运用基因突变的原理来培育新品种 D . 成功地将目的基因导入受体细胞便完成了基因工程的工作

转基因抗虫植物含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，对人体无毒，但是鱗翅目昆虫幼虫的肠道里有Bt蛋白的受体，Bt蛋白与受体结合导致肠道壁穿孔，使幼虫死亡。下列叙述错误的是（）

A . 促进Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗虫效果 B . 可通过DNA分子杂交技术检测Bt蛋白基因的表达 C . 将Bt蛋白基因导人植物细胞的方法可使用农杆菌转化法和基因枪法 D . 将植物材料和农杆菌共同培养之前，植物材料需要消毒处理

细胞的种类不同，特异性表达的蛋白质也不同，如效应T细胞可以产生干扰素，乳腺细胞可以分泌乳腺蛋白，膀胱壁细胞可分泌尿血小板溶素膜蛋白。其中效应T细胞产生的干扰素（IFN）具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤等多种作用。请回答下列问题。

（1）通过分析干扰素的氨基酸序列，可人工合成编码干扰素的序列，该序列（填“是”或“不是”）唯一的。利用PCR的方法对人工合成的干扰素基因扩增时，用方法使DNA变性。
（2）目的基因在血液中表达的转基因动物叫做血液反应器。由于某些物质进入血液会影响动物的健康，因此血液生物反应器比较适合生产（选填“胰岛素”“抗体”或“干扰素”中的一种或多种）。
（3）乳腺生物反应器的原理是外源基因与的启动子构建成基因表达载体，使干扰素基因在乳腺中表达，通过回收乳汁获得干扰素。
（4）膀胱反应器可将干扰素基因插入基因中，使干扰素分泌到尿液中。与乳腺反应器相比，膀胱反应器的优势表现在。

下图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答：

图片_x0020_1130799317

（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的，加入抗生素是为了，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是。
（3）过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是，将获目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是。
（4）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是，该过程研究的意义在于解决问题。

新冠病毒表面特有的S蛋白能与人肺泡上皮细胞表面的特异性受体识别并结合，诱导病毒进入宿主细胞。我国科学家研发的人5型腺病毒（Ad5）载体重组新冠病毒疫苗已获得批准上市。该疫苗进入人体细胞后合成S蛋白，S蛋白由细胞内转移到细胞外，诱导人体产生免疫反应。该疫苗的制备流程如图所示。

回答下列问题：

（1）新冠病毒侵入人体内环境后，S蛋白在特异性免疫反应中充当。
（2）为确定S蛋白的受体是人肺泡上皮细胞表面的ACE2，下列实验及结果能支持该结论的有。

A . 添加外源性ACE2能阻断S蛋白与人肺泡上皮细胞的结合 B . 抗ACE2单克隆抗体能阻断新冠病毒入侵人肺泡上皮细胞 C . 编码S蛋白基因突变的新冠病毒不能入侵人肺泡上皮细胞
（3）新冠病毒的遗传物质是RNA，人5型腺病毒（Ad5）的遗传物质是DNA，从新冠病毒中获取的S蛋白的基因需经过过程获得相应产物后，才能用于构建重组Ad5。
（4）制备疫苗使用的Ad5已人工敲除了DNA复制必需的基因El，使得重组Ad5保留侵染人体细胞并表达基因的能力，但不能增殖。为实现疫苗的大规模工业化生产制备，需要对作为重组Ad5扩增培养的宿主细胞HEK293（来源于人）进行的人工改造是。通常，灭活疫苗需注射三针，随着接种次数的增加，抗体反应的质量越来越高，而重组Ad5疫苗只需注射一针即可达到近似的效果。接种数周后，接种者体内仍然能检测到重组Ad5的DNA和S蛋白。请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是。
（5）临床试验中有一部分人在注射该疫苗之前感染过Ad5，体内存在抗Ad5抗体，相较于未感染过Ad5的人员，该部分人员的抗S蛋白特异性抗体水平较低，原因是。

使用特定的DNA作“探针”，通过DNA杂交技术而确定死者的身份。常用的DNA“探针”是指：（）

A . 某一个完整的目的基因 B . 目的基因片段的特定DNA C . 与目的基因相同的特定双链DNA D . 与目的基因互补的特定单链DNA

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图），请结合图示回答下列问题：

（1）通常用幼龄或早期胚胎进行动物细胞培养，原因是；在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用酶处理。
（2）在对转基因奶牛细胞进行性别鉴定时最有效的方法是SRY-PCR法，该方法用牛Y染色体上的性别决定基因SRY作为特异性探针来检测PCR扩增产物，检测方法为技术，此过程需要设计引物，引物的作用是。
（3）将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛生出的犊牛与供体奶牛相比并不是100%的复制，原因可能是。
（4）上述转基因奶牛的克隆成功，说明了动物具有全能性。

去年年初，国内牛奶制品因为牧草进口成本上涨而涨价的现象引起了人们的关注。紫花苜蓿是一种重要的牧草，某研究团队拟将耐盐基因HLAl导入紫花苜蓿中培育耐盐牧草，具体实验流程如图甲，图乙是载体pCHLAl中T-DNA示意图。回答下列问题：

（1）过程②为的构建，是基因工程的核心，此过程需要使用的酶是。
（2）过程③常用的转化方法是，转化是指。
（3）已知Basta是一种除草剂，则为达到培养并筛选的目的，过程④的培养基所含的成分必须有无机营养、有机营养、。
（4）过程④得到的幼苗（填“一定”或“一定不”或“不一定”）含有HLAl基因，为进一步确认，可用PCR扩增的方法进行鉴定，则进行PCR反应的引物应根据设计，PCR的原理是。
（5）要检测目的基因是否插入到苜蓿细胞的染色体DNA上，可采用技术。
（6）判断本实验的目的是否表达成功，还应进行实验。

第2节 基因工程的基本操作程序 知识点题库

第2节基因工程的基本操作程序知识点题库