第1节 植物细胞工程 知识点题库

（1） Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的基因（填“含有”或“不含有”）启动子．若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因（基因序列未知），需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是．在PCR体系中需加入其中的（填“全部”或“任意1种”或“其中2种”）引物，若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为种．

（2） 在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有基因，其中是驱动基因转录的酶识别和结合的位点，而能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为．图示将目的基因导入受体细胞的方法是．

（3） 步骤Ⅳ中产生的细胞团称为，步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中的浓度比例，以便获得幼苗．

（1） 某食品公司得到一种高效酿酒的酵母菌菌株，并设计方案获得发酵产物。

①对于酵母菌的培养，比较适合它的培养基为（A.马铃薯蔗糖培养基B.MS培养基C.LB培养基D.牛肉汤培养基），除了要选择合适的培养基成分外，还要考虑培养基中营养物质的。

②欲知道这种微生物的繁殖速度，可用涂布分离法或对酵母菌进行计数。对培养到某一时期的培养液制备成10^-5的稀释液进行涂布分离，接种量0.1mL，三个培养皿生长的菌落数依次为25个、32个、18个，则培养液中的酵母菌数量为个/mL。

③在乙醇发酵中，通常采用以下步骤获取菌种→菌种→扩大培养→接种→发酵。不同微生物或同种微生物在不同环境条件下进行的代谢活动，所形成的代谢产物不同，使发酵食品的风味也不同。有时会因为发酵液放置过久等原因，导致出现酸味，可能发生了（用反应式表示）。

④对于发酵产物的获取，通常要经过，为了容易分离得到产物常对微生物细胞进行。

（2） 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，对多种癌症都有一定的疗效。最初用于研究和临床试验的紫杉醇都是从红豆杉树皮中提取。从36株60年生大树的树皮中才能提取到约1g紫杉醇，可治疗一个癌症患者。一些地方通过伐树生产紫杉醇，使野生资源遭受到了极大的破坏，保护其野生资源和扩大药源已成为当前急需解决的矛盾。

①科学家发现紫杉醇的抗癌机理是：紫杉醇能和微管蛋白聚合体相互作用，促进微管聚合并使之稳定，阻碍纺锤体的形成，从而阻碍。

②利用植物组织培养，让细胞产生紫杉醇是一条理想的途径。此培养方法的原理是。

③由于植物细胞壁的存在，植物的有一定的难度，可用处理该细胞，获得球形的原生质体，通过对原生质体的培养，获得能产生紫杉醇的。

④在获得原生质体的过程中，常常在渗透压溶液中，目的是。

（1） 基因D导入农杆菌之前需要用提前处理农杆菌，使其成为感受态细胞。Ti质粒中的抗生素抗性基因（填“能”或“不能”）用来筛选鉴定已经成功导入基因D的农杆菌，原因是。

（2） tms、tmr分别表示生长素基因和细胞分裂素基因，若两种基因随T-DNA转移到植物细胞中，可能会对愈伤组织的增殖和分化产生影响，若要保留tms、tmr，则需要选择限制酶对Ti质粒和基因D进行切割，若要剔除tms、tmr，则需要选择限制酶对Ti质粒和基因D进行切割。

（3） 研究人员将开白花植株的叶肉细胞和开红花植株的叶肉细胞放入（填“高渗”或“低渗”溶液，用纤维素酶和果胶酶处理两种细胞获得了有活力的原生质体，经聚乙二醇诱导融合后，获得杂种细胞，再采用技术，成功培育出开粉色花的植株。

（1） 过程①是用 （答出2种）处理，以获得原生质体。过程②常用的物理诱导方法是（答出3种）等。

（2） 杂种细胞形成的标志是，这与细胞内（细胞器）有密切关系。

（3） 过程③称为，在（填“光下”或“避光"）条件下培养，常用的固体培养基中主要包含无机营养、有机营养、激素和琼脂等，常添加的植物激素是（答出2种）。

（4） 实验过程中，要特别注意所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作，这是因为（答出两点）。