题目

现代生物技术能利用普通山羊生产人β一酪蛋白。请回答有关问题：（1）首先需要从人_______中获得人β一酪蛋白基因，将其与运载体结合成重组人β一酪蛋白基因表达载体，此过程需要的酶是_______。通过显微注射技术将表达载体注射到_______中。（2）通过动物细胞培养技术，将培养到_______时期的胚胎进行移植，移植前需要对受体进行_______处理，使其能正常着床，最终获得表达人β一酪蛋白的转基因山羊。（3）要取得经济效益，可通过_______技术获得扩大的转基因山羊群体。（4）若用分子水平方法判断获得的转基因山羊中人β一酪蛋白基因是否表达，可检测_______A．质粒载体 B．转录产物 C．人β一酪蛋白基因 D．病原微生物 答案：【答案】cDNA文库（基因文库） 限制性核酸内切酶，DNA连接酶 普通山羊的受精卵（普通山羊的卵母细胞） 桑椹胚（或“囊胚”） 同期发情 核移植（或“胚胎分割移植”） B 【解析】基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不同。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术；④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。（1）本题中获取β一酪蛋白基因可以从人的cDNA文库（基因文库）直接获取目的基因；基因表达载体的构建需要用限制酶切割运载体，然后用DNA连接酶将目的基因和运载体连接；基因工程中常用动物的受精卵作为受体细胞，因此通过显微注射技术，将基因表达载体注射到普通山羊的受精卵中。（2）胚胎移植一般选用发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行移植；为了使胚胎移植能成功，需要对代孕山羊进行同期发情处理，使之与供体的生理状况保持相同，使胚胎能正常着床。（3）可通过胚胎分割移植或核移技术，获得更多个体，扩大转基因山羊群体。（4）若从分子水平检测转基因山羊中人β一酪蛋白基因是否表达，可检测其是否转录出相应的mRNA，或翻译出相应的蛋白质，B正确。故选B。

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