基因工程的基本工具（详细） 知识点题库

某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如图，下列有关叙述错误的是

用DNA连接酶把被限制性核酸内切酶I（识别序列和切点是—↓GATC—）切割过的质粒和被限制性核酸内切酶Ⅱ（识别序列和切点是—G↓GATCC—）切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子如右图所示，该重组DNA分子能够再被限制性核酸内切酶I切割开的概率是（  ）

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是（    ）

基因工程中所用的工具酶是限制酶、运载体、DNA连接酶。

为实现目的基因与运载体结合，以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质，研究人员进行了如图所示操作．请分析回答下列问题：

（1）图表示用BamH I切割含目的基因的 ，质粒经相同限制酶处理后，经 的作用获得a，a称作 ．将a与感受态大肠杆菌混合后，混合物应接种在含有的培养基上．质粒中抗氨苄青霉素基因称为 ，在筛选过程起作用．若要证明培养基是否符合实验要求，培养基上需接种 的感受态大肠杆菌，培养后不出现菌落则培养基合格．

（2）DNA分子中，一条链中的两个核苷酸通过 相连，已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，构建a的过程中用该酶处理质粒，但目的基因不用碱性磷酸酶处理，这样做的目的是 ． 如果要检测目的基因 是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌的 ， 用相应抗体检测．

图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图．据图回答：

（1）甲图所示为 技术，可以用来扩增目的基因．此过程中所使用的酶是 

（2）乙图为获得抗虫棉技术的流程．A过程需要的酶有 、 ．图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是 ． 在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．则C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 

（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用标记的与提取出的 做分子杂交．

将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶．下列叙述错误的是（　　）

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（apm^r为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．

现有一长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ，KpnⅠ同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子．该DNA分子的酶切图谱正确的是（    ）

质粒是基因工程中最常用的运载体．质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功．外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有 a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（　　）

	细菌在含青霉素培养基上生长情况	细菌在含四环素培养基上生长情况
①	能生长	能生长
②	能生长	不能生长
③	不能生长	能生长

内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽．内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应．ET_A是内皮素的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ET_A基因在细胞中高效表达，为后期ET_A的体外研究奠定基础．其过程如图（图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为C^↓CCGGG，限制酶XhoⅠ的识别序列为C^↓TCGAG）．请分析回答：

  2018年11月，一对名为“露露”和“娜娜”的基因编辑婴儿的诞生引发了国内巨大的争议。基因编辑过程的实质是用特殊的引导序列将“基因剪刀——Cas9酶”精准定位到所需修饰的基因上然后进行编辑。回答下列问题：

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是（    ）

[生物——选修3：现代生物科技专题]

    甘露聚糖酶是分解纤维素的重要酶。该酶大量存在于土壤纤维素分解菌中。现采用基因工程方法将甘露聚糖酶基因导入动物肠道酵母菌中，以帮助动物消化纤维素。请回答：

下列关于质粒的叙述，正确的是（   ）

某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法不正确的是（   ）

在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶（R₁和R₂）处理基因载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。下列叙述正确的是（   ）

目前市面上许多疫苗是应用基因工程技术生产的，在基因工程的实验过程中，把目的基因和运载体连接起来的是（   ）

菲尔和梅洛因发现了RNA干扰现象（RNAi），获得了2006年诺贝尔生理学或医学奖。RNA干扰的机制如下：双链RNA一旦进入细胞内就会被一个称为 Dicer的特定的酶切割成21～23个核苷酸长的小分子干涉RNA（SiRNA）。Dicer能特异识别双链RNA，以ATP依赖方式切割由外源导入或者由转基因、病毒感染等各种方式引入的双链RNA，切割产生的SiRNA片段与一系列酶结合组成诱导沉默复合体（RISC）。激活的RISC通过碱基配对结合到与SiRNA同源的mRNA上，并切割该mRNA，造成蛋白质无法合成（如下图所示）。请回答下列问题：

图甲、乙分别表示EcoRI和SmaI限制酶识别序列和切割位点（图中箭头处），可形成不同的末端。据图分析，下列说法正确的是（  ）