尿素分解菌的分离与计数知识点题库

下列叙述不正确的是( )

A . 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离 B . 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C . 如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功 D . 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是( )

A . 将土壤用无菌水稀释,制备10³~10⁵稀释倍数的土壤稀释液 B . 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上 C . 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌 D . 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株

如图是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题．

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O
1.4g	2.1g	0.2g
蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）图中方框内应该填写的实验步骤是，此步骤中起主要作用的微生物是，其发酵时（需要/不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？（能/不能），原因是

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是．通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入指示剂．

在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于（）

A . 空白对照 B . 标准对照 C . 相互对照 D . 条件对照

欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（）

A . 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B . 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C . 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D . 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

关于对分解尿素的细菌进行分离、计数的实验叙述，错误的是（）

A . 统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌 B . 统计菌落数目时，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌 C . 设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰 D . 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，通过检测培养基的pH的变化，还不能准确鉴定培养基中的细菌就是能够分解尿素的那种

图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。

（1）图中选择培养基应以为唯一氮源；鉴别培养基还需添作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成色。
（2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较。
（3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为，突变基因表达的蛋白质含个氨基酸。

饮料酒在生产过程中会产生少量尿素，酒体呈酸性。尿素能与酒精反应生成有害物质，脲酶能分解酒体中的尿素。请回答下列问题：

（1）对土壤溶液中酸性脲酶菌进行富集培养(初筛)时，培养基的氮源应选用，与固体培养基相比，液体培养基更适于富集培养的原因是。
（2）复筛酸性脲酶菌的培养基为中性固体培养基，以酚红为指示剂。经接种、培养后，发现平板上有的菌落周围出现红色圈，有的没有。在挑选时，应选择(“有红色圈的菌落”无红色圈的菌落”)。
（3）从酸性脲酶菌中提取脲酶后，不宜直接将脲酶加入酒体中，原因是。将酸性脲酶和海藻酸钠混合，用注射器滴入凝结液中形成珠粒，这种固化酶的方法称为。研究发现海藻酸钠浓度过高时脲酶的活性偏低，原因是。
（4）工业化处理酒体中尿素时，若酒体在一次流经酸性脲酶凝胶反应柱后，尿素含量仍高于产品标准，在不增加柱高的前提下，改进生产工艺流程的措施是。

下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）

A . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、葡萄糖、琼脂、水 C . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、尿素、琼脂、水 D . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

下列实验所用主要试剂及仪器对应正确的一组是（）

A . 观察植物细胞的质壁分离及复原——清水、盐酸、光学显微镜 B . 观察细胞的有丝分裂——解离液、清水、甲基绿、光学显微镜 C . 探究酵母菌种群数量的动态变化——酵母培养液、血球计数板、光学显微镜 D . 分离以尿素为氮源的微生物——MS培养基、酚红、涂布器、酒精灯

可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）

A . 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B . 以尿素为唯一氮源的培养基中加入伊红—美蓝试剂 C . 以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D . 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）

A . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgS0₄.7H₂O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄.7H₂O、葡萄糖、琼脂、水 C . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄.7H₂O、尿素、琼脂、水 D . KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄.7H₂O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

为了分离以尿素为氮源的细菌，下列叙述正确的是（）

A . 需要配制LB固体培养基用于筛选该细菌 B . 应将培养皿倒置于4℃恒温培养箱内培养 C . 筛选该细菌的方法是划线分离而非涂布分离 D . 将目的菌接种在斜面培养基上培养24h后保存于冰箱

下表是一种细菌培养基配方，请回答下列问题：

（1）该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供。
（2）该培养基属于______________培养基。

A . 液体 B . 固体 C . 鉴定 D . 选择 E . 天然
（3）如果要对培养基的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行。
（4）制备培养基的操作步骤是_________________。（用下列字母排序）
a.倒平板 b.计算 c.溶化 d.称量 e.灭菌

A . a→b→c→d→e B . e→b→d→c→a C . b→d→c→a→e D . b→d→c→e→a
（5）某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数（取10克该土壤加90mL无菌水制成稀释液）。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：121、212、256，则每克该土壤样品中的菌落数为。
（6）分离土壤中分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、、样品涂布到培养基上、挑选。

为了筛选出能产生脲酶的微生物，应当从下列哪一种环境中选择（）

A . 施用尿素较多的农田 B . 施用氨肥较多的农田 C . 施用磷肥较多的农田 D . 落叶较多的地方

下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述,错误的是(　　)

A . 该实验需要设置空白对照组,以检验培养基是否受到杂菌污染 B . 分解尿素的细菌能产生脲酶,脲酶能分解尿素产生氮气 C . 统计尿素分解菌的数目时,以菌落数为30~300的平板进行计数 D . 该实验所用培养基应以尿素作唯一氮源

下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（）

A . 分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液 B . 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同 C . 测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法 D . 接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布

下列叙述中不正确的是（　　）

A . 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 B . 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C . 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些菌种 D . 如果得到了三个或三个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数

如图是研究人员从土壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（）

A . 在配制步骤②、③的培养基时，应注意防止杂菌污染 B . 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，获得单细胞菌落 C . 步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D . 步骤④应挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力

[选修一：生物技术实践]

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能将其直接吸收利用，而是通过土壤中的细菌将其分解为氮和CO₂后才能被农作物利用。请回答下列问题：

（1）土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成。）
（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是。
（3）一般依据尿素分解菌菌落的、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10⁶的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为个。上述过程采用的接种方法是。
（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是。

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