单克隆抗体的优点及应用 知识点题库

（1） 制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有的特点是：。

（2） 单克隆抗体的特点是。

（1） 图1所示为植物体细胞杂交的流程。图1中“去壁”要使用的酶是 ；①过程常采用的方法有物理法和化学法，物理法包括等；③过程和④过程分别表示。

（2） 图2所示为制备单克隆抗体的流程。图中“筛选”包括选择培养和抗体阳性检测。其中能在特定的选择培养基中存活的细胞是，而抗体阳性检测的目的是。

（3） 图2中，促进细胞融合的方法中，不同于图1中促进细胞融合所涉及的方法是；筛选中的目标细胞还可以注射到小鼠腹腔内增殖，从中提取单克隆抗体。与普通抗体相比，单克隆抗体具有等优点。

（1） 将等量的纯化VspX蛋白作为分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。

（2） 在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是。然后取小鼠的脾脏细胞用试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到。

（3） 一段时间后，将（2）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如下图。

①在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成，并加入多孔板培养槽中的（细胞、上清液），即待测样本。

②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与结合的酶标抗体洗去。

③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表。

（4） 将上述细胞经酶处理，制成细胞悬液，除添加一般营养物质外，还需加入，并置于中进行扩大培养，提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测，结果如下图

实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与3、4结合，具有很强的，可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病等方面的研究。

（1） 步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。

（2） 步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从分离出ES细胞。

（3） 步骤③中，需要构建含有基因Rag₂的表达载体。可以利用扩增Rag₂基因片段。用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有和的酶切位点。

（4） 为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用进行杂交实验。

（1） 在制备抗 HSV 单克隆抗体过程中，先给小鼠注射一种纯化的 HSV 蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了免疫反应。

（2） 依据细胞膜的的特点，运用化学试剂诱导B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合。再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是。

（3） 若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其，再提取腹水进行离心，从而得到所需抗体，该抗体具有等特性。

（4） 科学工作者正在研究用于治疗癌症的“生物导弹”，即单克隆抗体上连接抗癌药物。 “生物导弹”治疗癌症与普通化疗相比的优势是。

（1） 该过程中用到的现代生物技术有。

（2） ⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为。

（3） 鸡胚细胞中蛋白质的检测方法为,在小鼠体内蛋白质 A 作为。

（4） 要快速获得大量的 A 基因可采用技术。

（5） ⑦过程要得到是能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞要经过次筛选,最终是为了筛选出。

（1） 下图所示转铁蛋白受体（TfR）与转铁蛋白（Tf）结合，通过胞吞方式，将铁元素运输至胞内。肿瘤细胞由于增长快速，需要更多的铁元素，因此肿瘤细胞表面TfR 表达量(上升或下降)。利用单克隆抗体技术，可研制相应的抗TfR抗体，它们与TfR特异性结合， 进而影响肿瘤细胞增长。

（2） 若想获得单克隆抗体，可将的小鼠的B 细胞与融合，继而筛选出的杂交瘤细胞，大量培养获得相应抗体，由于该抗体来源于小鼠，称为鼠源单克隆抗体。

（3） 将该鼠源单克隆抗体与人癌细胞混合后培养，发现单独使用抗体对人癌细胞的增殖无显著影响，可能的原因是抗体与细胞表面TfR结合后，为探究该假说成立与否，采用荧光标记定位的方法，结果发现抗体出现在细胞膜上和细胞内，则此实验结果支持该假说。

 

（4） 由于在本实验中单独使用抗体效果不佳，考虑利用抗体介导杀伤细胞对靶细胞的裂解作用来抑制癌细胞，该过程如图2所示。若无论何种抗体，杀伤细胞都可与之结合，最终使靶细胞裂解死亡，则说明抗体Fc段在不同种类的抗体中（相同或不同）。

（5） 人的杀伤细胞无法识别鼠源单克隆抗体的Fc段，科学家为此构建了人-鼠嵌合抗体。该过程基本流程排序为__________。

（1） 培养新冠病毒需先培养动物细胞，动物细胞培养除对培养液和培养用具进行灭菌外，还要通过来保证培养液的无毒。

（2） 若用小鼠来制备抗新型冠状病毒的单克隆抗体，制备过程中需向小鼠注射，使小鼠产生免疫反应，从小鼠脾细胞中获得相应的 B 淋巴细胞，诱导小鼠的B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，之后还需用HAT培养基筛选，筛选过程中的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞可以存活。

（3） 经HAT培养基筛选得到的杂交瘤细胞的特点是。

（4） 为尽快提高新型冠状病毒的检测效率，某团队紧急研发了新型冠状病毒化学发光检测试剂盒，该试剂盒以单克隆抗体为主要“部件”诊断人体是否携带新冠病毒，其诊断利用的免疫学原理是。

（5） 目前接种疫苗仍是阻挡新型冠状病毒传播最有效的方式。2021年2月25日，由中国工程院院士陈薇团队领衔研发的我国重组新冠疫苗上市注册申请获得批准。现用实验动物检测疫苗接种后机体产生抗体的能力。根据下表信息，得出接种新冠疫苗的较佳方案为。

组别（40只）	浓度（单位：VP）	剂量（支）	间隔时间（周）	抗体水平（相对值％）
1	4×105	2	2	94.43
2	5×105	2	2	96.26
3	4×105	2	4	97.56
4	5×105	2	4	98.87

（1） 玉米和高粱都是二倍体，染色体数目均为20条，科学工作者经过长期实验，培育出“玉米—高粱”杂种植株（如图所示）。

①玉米和高粱之间存在 ， 用传统的有性杂交方法不能得到二者的杂种后代。科学家采用体细胞杂交的方法得到了“玉米—高粱”杂种植株。

②为了便于筛选，可以选取玉米叶肉细胞的原生质体和高粱填“叶肉细胞”或“根部细胞”）的原生质体进行融合。培养基中最多有种细胞可供筛选（融合的细胞仅考虑两两融合），体系中出现多种类型细胞的原因是。

③原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体通过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
 

（2） 利用如图所示细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

①与血清抗体相比，单克隆抗体的优越性体现在：

②动物细胞融合的方法中有别于植物原生质体融合的是

③制备单克隆抗体过程中﹐两次筛选的方法不同，第二次筛选是通过获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。