动物细胞工程的常用技术与应用 知识点题库

（1） 实验思路（药物加入设计画在下面的12孔细胞培养板示意图中即可，无需再文字说明；药物可用甲、乙表示；药物作用3天，每24h检测一次，无需前测；重复实验不要求）

（2） 若GnRH类似物、顺铂都能抑制血管生成，且联合作用效果更佳。请画出药物作用48h时血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量的柱形图。

（3） 实验分析：

①促性腺激素释放激素由产生。

②如果已得到上述第（2）小题中的实验结果，为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步你将选用身体状况一致的动物，随机均分后，分组进行药物处理，观察。

（1） 胸腺素β4（Tβ4）是动物体内一种分布广泛的多肽，在细胞的上合成，通过影响组成细胞骨架的纤维的组装影响细胞的迁移和分化。

（2） 研究表明，Tβ4可促进动物毛发生长。研究者利用基因编辑技术将Tβ4基因定点敲入绒山羊基因组中，获得新型绒山羊，操作过程如图1。

①以普通绒山羊体细胞基因组为，选择图1中的引物组合进行PCR扩增，筛选出Tβ4基因定点整合的细胞。

②图1 中的X为细胞，将获得的重组细胞发育成的94个早期重构胚胎移植到母羊体内，成功获得一只Tβ4基因定点整合的羔羊1704。

③绒山羊的皮肤有两种毛囊，初级毛囊（P）产粗毛，次级毛囊（S）产绒。绒细度是确定羊绒品质的重要指标，研究者对1704的羊绒产量及品质进行检测，检测结果如图2、图3。

结果表明。

（3） 图1所示技术的成功率非常低，各个技术环节也有待进一步改进。若要快速、大量繁育Tβ4基因定点整合的绒山羊，还可以使用的现代生物技术有。

（4） 图4为细胞迁移、增殖和分化的主要信号通道。信号分子VEGF束缚于细胞外基质的凝胶结构中，MMPs可通过降解细胞外基质释放VEGF，TIMP3是MMPs的抑制剂。Tβ4通过激活图示的信号通路促进绒山羊绒毛生长。据此推测，与对照组相比， Tβ4基因定点整合绒山羊体内TIMP3、VEGF和P38三种物质含量变化情况依次是。

（1） 图中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从和中分离获取．

（2） 过程Ⅰ将胚胎干细胞置于y射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物 血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态．在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的，加入抗生素是为了．该过程对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义．

（3） 过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有的特点．在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是．

（4） 过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导人胚胎干细胞之前需构建基因表达 载体，目的是．将构建好的表达载体导入胚胎干细胞最常用的方法是．

（5） 过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官．实验时，必须去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是，该过程研究的意义在于解决问题．

（6） 该研究中，包含的生物技术有（至少写出两种）．