基因工程的应用 知识点题库

（1） 酚氧化酶与酚类底物分别储存在细胞的不同结构中．能实现这样的分类存放是因为细胞内具有系统，组成该系统的结构具有的功能特性是 ．

（2） 把含有酚氧化酶的提取液作如下表的处理，完成下列问题：

步骤 试管	①酚氧化酶提取液的处理	②加入缓冲液	③加入酚类底物	实验后的颜色
A	不作处理	2mL	2mL	褐色
B	加入蛋白酶，10分钟	2mL	2mL	无色
C	加入三氯乙酸（强酸），10分钟	2mL	2mL	无色

推测实验后，试管C中的颜色是 ． 试管A，C对照，你能提出什么结论？ ． 试管A，B对照，说明酚氧化酶的化学本质是 ．

（3） 基因工程已应用在抗褐变品种的改良上，目前比较成功的是反义RNA技术（反义RNA可直接作用于靶MRNA的SD序列和部分编码区，直接抑制翻译）．有人将一段cDNA片段通过的方法导入马铃薯的细胞中，并表达得到反义的RNA，结果块茎中的酚类物质氧化受阻，表皮被擦破后不发生褐变．你认为反义RNA发挥作用的原因可能是 ， 阻碍了翻译过程的进行．

（1） 如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做马铃薯的．

（2） 据图分析，构建重组质粒时，用酶对含目的基因的DNA和质粒同时进行处理．

（3） 重组质粒中，目的基因的两端还必须有和终止子．用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，采用技术检测转基因马铃薯的上是否插入了目的基因，同时还要采用 技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达．

（4） 培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外，还需添加的物质是，添加卡那霉素的作用．

（1） 实验思路：①………

实验结果：实验后发现，三组中，IPTG诱导浓度为中的这组，诱导后所得RaxST酶浓度高于IPTG浓度为高的和低的这两组。

（2） 根据（1）的思路和结果，请用曲线图来体现这一结果。

（3） 该实验中，转基因技术所涉及的变异原理是 。

（4） 大肠杆菌生产得到的硫酸化酶RaxST（胞外酶）是/否）具有生物活性。

（1） 若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是之间相连的化学键。

（2） 图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__。

（3） 若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过第次循环会产生等长的目的基因，该次循环能产生个这样的片段。

（4） 为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__种。

（5） 如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是。

（1） 欲获得大量绿色荧光蛋白基因可利用PCR技术，其基本原理是，延伸过程中需要使用酶。

（2） 过程C处理所用的酶是，处理的目的是。

（3） 过程E中若要获得大量的卵母细胞需用激素处理成年母猪。过程H的名称是。早期胚胎能移入代孕母猪的子宫的生理学基础是。

（4） DNA粗提取实验中选取鸡血作为实验材料，如选用植物细胞作为实验材料需用处理。

（1） 通过途径2、3获得幼苗的过程都应用了植物组织培养技术，该技术依据的生物学原理是。

（2） 要尽快获得能稳定遗传的基因型为HHrr的优良品种，应采用途径，图中该过程秋水仙素的作用时期是，作用的机理是。

（3） 品种A与途径3中秋水仙素处理前的幼苗基因型相同的概率为；品种C的单倍体（填“可育”或“不可育”）。

（4） 途径4依据的原理是，从育种结果来看，此途径与杂交育种相比，最突出的特点是。

（5） 若需培育抗虫的番茄，使番茄植株细胞中能表达某细菌的毒蛋白基因，可采用的育种方法是，其中需要使用的工具酶是、。

（1） 某HD家系图（图1）及每个个体CAG重复序列扩增后，电泳结果如图2。

①据图1判断HD是一种染色体遗传病。

②据图推测，当个体的所有H基因中CAG重复次数25次时才可能不患病。与Ⅰ-1比较，Ⅱ-1并未患病，推测该病会伴随呈渐进性发病。

③与Ⅰ-1比较，Ⅱ-1、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的H基因中CAG重复次数均有增加，这表明患者Ⅰ-1过程中异常H基因的重复次数会增加。

（2） 由于缺乏合适的动物模型用于药物筛选，HD患者目前尚无有效的治疗方法。我国科学家利用基因编辑技术和体细胞核移植技术成功培育出世界首例含人类突变H基因的模型猪，操作过程如图3。

①从可遗传变异类型来看，模型猪发生的变异是。

②筛选含有目的基因的体细胞，将细胞核移植到中，构建重组细胞，再将重组细胞发育来的早期胚胎移植到代孕母猪体内，获得子代F₀ ， 此过程体现出动物细胞核具有。

③将F₀与野生型杂交得到F₁ ， F₁再与野生型杂交得到F₂。在F₀、F₁、F₂中，更适合作为模型猪的是F₂个体，理由是。

（1） 将乳糖酶基因转入大肠杆菌，获得营养菌（能利用乳糖）；将抗生素CRO降解酶基因转入大肠杆菌，获得抗性菌。将得到的两种菌分别接种于培养基进行扩大培养。

（2） 将两种菌分别用进行一系列梯度稀释，然后用法单独接种于加入含CRO并以乳糖为唯一碳源的培养基中， 培养一段时间后，培养皿中均未出现菌落，推测两种菌（填“发生”或“未发生”）可遗传变异。若将两种菌混合接种，则培养一段时间后，培养皿中有菌落长出，且同时含有两种菌，推测两种菌实现了“互利共生”。

（3） 为进一步探究上述现象的原因，科研人员设计了图1所示装置进行实验。

①在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板左侧，加入含的培养基，培养基可从左侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。定期检测混合菌液培养板上两种菌的数量，得到图2所示结果。

②0~10 h，营养菌的数量变化是。

③10~45 h，营养菌和抗性菌的变化趋势是二者均显著增加并逐渐，其原因是。

（1） 烟草的自交不亲和性是由位于一对同源染色体上的复等位基因(S₁、S₂……S₁₅)控制，以上复等位基因的出现说明该变异具有特点。

（2） 烟草的花粉只有通过花粉管伸长（花粉管由花粉萌发产生）输送到卵细胞所在处，才能完成受精。下表为不亲和基因的作用规律：

亲本组合	S3S4♂×S1S2♀	S1S2自交	S1S2♂×S1S3♀
花粉管萌发情况	S3、S4花粉管都能伸长	S1、S2花粉管都不能伸长	只有S2花粉管能伸长

①将基因型为S₁S₄的花粉授于基因型为S₂S₄的烟草，则子代的基因型为；自然条件下，烟草不存在S系列基因的纯合个体，结合表格结果说出理由：。

②在杂交育种时，用两种自交不亲和的植株做亲本，可以省略杂交过程的操作。

（3） 科学家将某抗病基因M成功导入基因型为S₂S₄的烟草体细胞，经植物组织培养后获得成熟的抗病植株。如图，已知M基因成功导入到S₂所在II号染色体上，但不清楚具体位置。现以该植株为 （父本或母本），与基因型为S₁S₂的个体杂交，根据子代中的抗病个体的比例确定M基因的具体位置。

Ⅰ. 若后代中抗病个体占，则说明M基因插入到S₂基因中使该基因失活。

Ⅱ.若后代中抗病个体占，则说明M基因插入到S₂基因之外的其它部位。

（4） 用遗传图解分析Ⅰ情况（转基因亲本基因型S₄M，亲本表现型不做要求）。

（1） 已知CAR基因的全部序列，科研人员通过法和PCR技术可获得大量该基因片段。在PCR反应体系中除模板外还需加入。

（2） 治疗基本过程是：分离患者T细胞并构建CAR-慢病毒运载体→体外基因转移形成CAR-T细胞→筛选、培养CAR-T细胞→输入患者体内，该疗法属于治疗，该运载体进入人体细胞的方式通常是。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是。

（3） 为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可采用法检测，CAR-T细胞培养基中通常需加入等天然成分，传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用处理后再进行分瓶培养。