基因工程的原理 知识点题库

（1） 科研人员构建含已知序列 T-DNA 片段的，转化野生型拟南芥，导致被插入 基因发生，筛选和自交得到了 2 种纯合突体 AtSUC 3 和 AtSUC5。

（2） 为研究 AtSUC3 和 AtSUC5 基因的传递规律，上述 2 种纯合突变体杂交得 F₁ ， F₁ 自交获得 F₂。依据 AtSUC3、AtSUC5、T-DNA片段（完整的T-DNA 过大，不能完成 PCR）序列设计引物分别为 I~VII（如下图所示）。

①PCR1 利用引物（填写引物代号）可克隆 AtSUC5，标记为A；PCR2 利用引物（填写引物代号）可克隆被 T-DNA 插入的 AtSUC5，标记为 a；PCR3 克隆 AtSUC3，标记为B；PCR4 克隆被 T-DNA 插入的 AtSUC3，标记为 b。

②部分F₂ 植株的PCR情况见下表

基因型	i	ii	iii	iv	v
PCR1	+	_	+	?	…
PCR2	+	+	-	?	…
PCR3	+	+	-	?	…
PCR4	+	_	+	?	…

“＋”有PCR 产物    “－”无 PCR 产物

表中i植株的基因型为（用A、a、B、b表示）。若表中 v植株为AtSUC3/AtSUC5 双突变纯合子，其对应的 PCR1~ PCR4 结果依次为（用“+”或“-”表示）。若 AtSUC3/AtSUC5 双突变纯合子在 F₂ 所占比例为 n²（n² 远远小于 1/16），则亲本型配子的比例为，说明AtSUC3 与 AtSUC5 的位置关系为。

（3） 拟南芥的果实为角果，成熟后可自然开裂传播种子。进一步研究发现，AtSUC3纯合突变体的角果开裂率较野生型明显降低，AtSUC3/AtSUC5双突变纯合子角果开裂率介于两者之间，说明 AtSUC3、AtSUC5基因功能关系为（选择填写“协同”或“拮抗”），共同控制拟南芥种子的传播。

（1） 过程①代表的是，过程②所构建S基因重组载体中，是重新构建的，它们应该能被受体细胞的RNA聚合酶所识别。

（2） 在给小鼠皮下注射S蛋白时，要重复注射几次，其目的是。

（3） 在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是将筛选出来，第二次是将筛选出来。

（4） 对健康人进行SARS-CoV-2免疫预防时，可以用灭活的SARS-CoV-2或图中基因工程生产的来制备疫苗。对COVID-2019疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与SARS-CoV-2进行核酸序列比较，或与图中的进行特异性检测。