DNA的粗提取和鉴定知识点题库

实验材料的选择是科学家探究的一个关键环节。下面有关洋葱的叙述正确的是（）

A . 表皮细胞呈紫色，可用于叶绿体色素的提取 B . 根尖细胞分裂旺盛，可用于观察细胞有丝分裂实验 C . 表皮细胞液浓度高，吸水容易涨破，可用于DNA提取实验 D . 表皮细胞具有紫色大液泡，可用于观察植物细胞的吸水与失水实验

下列有关实验材料的替代错误的是（）

A . 无双缩脲试剂，用配制斐林试剂的材料等也能检测蛋白质 B . 无鸡血细胞，用香蕉、洗涤剂、食盐等也能提取DNA C . 无过氧化氢酶，用淀粉酶等也能做pH影响酶活性的实验 D . 无紫色洋葱表皮细胞，用根毛细胞等也能做质壁分离实验

对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是（）

A . 利用DNA能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离 B . 在用花菜作实验材料时，研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜 C . 在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可提高DNA纯度 D . 利用DNA在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA与杂质分离

下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法，正确的是（）

A . 在提取DNA时，用嫩肉粉主要是为了除去以RNA为主的大分子杂质 B . 溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL二苯胺试剂即变蓝色 C . DNA粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用猪血 D . 提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来

某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后，尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验．通过查阅资料，制订了以下的实验方案：

【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

【实验目的】1．从酵母中提取RNA；2．鉴定RNA．

【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料，其中以酵母尤为理想，因为酵母核酸中主要是RNA，DNA很少，菌体易收集，RNA易分离．RNA不溶于乙醇和无水乙醚．RNA热稳定性较蛋白质强．利用稀碱法（稀碱能使细胞壁溶解）或高盐法（高浓度的盐改变细胞膜的通透性）来释放RNA．RNA水解液（加硫酸、加热）+苔黑酚﹣FeCl₃试剂加热直到沸腾1分钟，会呈现墨绿色．

【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等；0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚﹣FeCl₃试剂等．

【实验步骤】

①称6克干酵母②加0.2%氢氧化钠45mL，沸水加热20分钟，搅拌，后加乙酸7滴③离心10分钟后取上清液④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟⑤离心后先用95%乙醇洗两次，再用无水乙醚洗两次⑥获得RNA粗制品⑦RNA鉴定

请根据实验方案，思考并回答下列问题：

（1）酵母菌细胞中的RNA主要分布在中．酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料，理由是．
（2）实验步骤⑤中，离心后取（填“上清液”或“沉淀物”）用乙醇、无水乙醚进行洗涤．
（3） RNA提取过程要注意温度的控制，在20～70℃的温度范围内停留的时间不能太长，其原因是；
（4）稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的，一是，二是，以便获得更多更纯净的RNA．
（5）若用花椰菜来提取DNA，可用瓦解细胞膜，然后充分研磨，实验中研磨速度要．

如图是某高等生物细胞局部结构模式图．请分析回答：

（1）一般可认为该图细胞处在时期，图中有个染色体组，份DNA．该生物细胞中，染色体数最多有条．
（2）该生物的同化作用类型是．
（3）如果a上某位点有基因B，a上相应位点的基因是b，发生这种变化的原因是．
（4）要鉴定图中1的主要成分，理论上选用的鉴定试剂是．

实验操作不当一般情况下不能达到预期结果，但有的实验或调查若能及时调整也能完成．下列有关叙述合理的是（　　）

A . DNA的粗提取实验中，如没有95%的冰酒精，可用冰的高度白酒代替 B . 探究温度对唾液淀粉酶活性影响实验中，如发现试管中反应溶液pH为0.9时，可调至中性 C . 探究培养液中酵母菌种群数量时，若视野中酵母菌数量过多则可进一步稀释培养液后再计数 D . 鉴定蛋白质时，若只有斐林试剂的甲、乙液，可适量减少滴加斐林试剂乙液的量

在DNA粗提取过程中涉及到三次过滤：（）

①过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；

②过滤含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液；

③过滤溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。

以上三次过滤的目的是分别为了得到

A . 含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液 B . 含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、含DNA的滤液 C . 含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、纱布上的DNA D . 含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液

PCR技术成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是DNA半保留复制。

（1）在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
①PCR即，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。加热使DNA双链打开，这一步是打开键，称为变性。
②当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，此过程中原料是脱氧核苷酸，遵循的原则是。
③若将一个用¹⁵N标记的DNA分子放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次以后，则¹⁵N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后需要个引物。
④某样品DNA分子中共含5 000个碱基对，碱基数量满足：A+T/G+C＝2/3，若经4次循环，至少需要向试管中加入个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
（2）下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
①图中实验材料A为洋葱。研磨前加入的B为洗涤剂和食盐，加入洗涤剂的目的是；加入食盐的目的是。
②通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是。
③DNA鉴定的原理是。

“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性，EDTA能螯合Mg²⁺、Mn²⁺ ，抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。

CTAB			SDS
OD260	OD280	OD260/OD28	OD260	OD280	OD260/OD28
0.003	0.018	1.833	0.006	0.005	1.200

请回答下列问题。

（1）与常温下研磨相比，液氮中研磨的优点是；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是。
（2）氯仿一异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿一异戊醇，实验过程中加入氯仿一异戊醇离心后，应取①加异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是。
（3）两种方法中，法提取的DNA较多，其可能原因是。
（4）两种方法中，法提取的DNA纯度较低，其含有的主要杂质是。

下列关于生物实验的叙述，不正确的是（）

A . 脂肪的鉴定实验中50%酒精的作用是杀死细胞，便于苏丹III染色 B . 在苹果的组织样液中加入斐林试剂，水浴加热后液体由蓝色变成砖红色 C . 分离叶绿体中的色素时，不同色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同 D . 猪的红细胞没有细胞核，故猪血不宜做DNA粗提取和鉴定的实验材料

下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是（）

	试剂	操作	作用
A	柠檬酸钠溶液	与鸡血混合	防止血液凝固
B	蒸馏水	与鸡血细胞混合	保持细胞形状
C	蒸馏水	加入到溶解有DNA的NaCl中	析出DNA丝状物
D	冷却的酒精	加入到过滤后DNA的NaCl中	产生特定的颜色反应

A . A B . B C . C D . D

在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的粘稠物分别按下表处理3次，则DNA主要集中在标号(　　)

操作	粘稠物	滤液
2 mol/L的NaCl溶液搅拌过滤	①	②
0.14 mol/L的NaCl溶液搅拌过滤	③	④
95%的冷酒精搅拌过滤	⑤	⑥

A . ①③⑤ B . ②③⑤ C . ①④⑥ D . ②④⑥

下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，错误的是（）

	相关操作	选用的试剂
A	破碎鸡血细胞	蒸馏水
B	溶解核内DNA	0.14mol/L的NaCl溶液
C	提取杂质较少的DNA	冷却的95%的酒精
D	DNA的鉴定	现配的二苯胺试剂

A . A B . B C . C D . D

生物学实验常呈现“五颜六色”的变化。下列实验中溶液颜色变化的叙述正确的是（）

A . 在新鲜的梨汁中加入斐林试剂，混匀后在加热条件下由无色变成砖红色 B . 在厌氧发酵的果汁中加入酸性重铬酸钾溶液，混匀后由蓝色变成灰绿色 C . 在DNA溶液中加入二苯胺试到，混匀后在沸水浴条件下逐渐变成蓝色 D . 在氨基酸溶液中加入双缩脲试剂，混匀后逐渐变成紫色

DNA变性后理化性质有下述变化，其中正确的是（）

A . 对260nm紫外线吸收减少 B . 溶液黏度下降 C . 磷酸二酯键断裂 D . 核苷酸断裂

下列实验操作和现象描述，不正确的是（）

A . 用二苯胺处理人的口腔上皮细胞，显微镜下观察到细胞核呈现红色 B . 用0.3g/mL蔗糖溶液处理紫色洋葱外表皮细胞，观察到紫色范围变小、颜色变深 C . 用苏丹III染液对花生子叶切片染色，再用50%酒精洗去浮色，在细胞中观察到橘黄色 D . 洋葱根尖经过解离、漂洗、染色和制片后，部分细胞中可观察到染色体

下列有关实验仪器、材料的使用和实验操作的叙述，错误的是（）

A . 在解离液中加入适量的纤维素酶，有利于提高洋葱根尖组织的解离效果 B . 制作泡菜时常将坛口用水封好，一段时间后水面会不断出现气泡 C . 使用血球计数板计数时，需先盖上盖玻片再滴培养液 D . 常温下体积分数为95％的酒精可以更好的析出杂质较少的DNA

哺乳动物的血红蛋白在含氧量高的地方易与氧结合，在含氧量低的地方易与氧分离，红细胞结合和携带O₂的过程并不影响二价铁离子。若血红蛋白中Fe²⁺被氧化为Fe³⁺ ，则形成高铁血红蛋白，O₂与其结合十分牢固，不易分离。若控制血红蛋白的基因发生突变，可引起血红蛋白结构改变，进而引发镰刀型细胞贫血症。下列说法错误的是（）

A . 高铁血红蛋白形成会导致组织细胞缺氧 B . 人体血液中红细胞吸收葡萄糖所需能量由无氧呼吸提供 C . DNA的粗提取可选用鸡的红细胞 D . 镰刀型细胞贫血症可通过显微镜观察到

在DNA指纹技术研究中认为，DNA中的高度重复序列具有高度可变性，但其高度重复序列中有一小段序列在所有个体中都一样，称为“核心序列”。下图是某刑事案例中女受害者、受害者体内精液和三位怀疑对象的DNA指纹图谱，请根据以上内容和指纹图谱回答下列问题：

（1）指纹图谱就是把“核心序列”串联起来作为探针，与不同个体的DNA进行就会出现各自特有DNA指纹图谱。应用DNA指纹技术，首先需要用酶将待测的样品DNA切成片段，然后用电泳的方法将这些片段按大小分开。
（2）提取动物细胞的DNA时需先破碎细胞，常用的方法是。为了纯化提取的DNA，可利用DNA在中溶解度的不同来去除杂质。在沸水浴的条件下，DNA遇会变成蓝色。
（3）一滴血、精液或是一根头发中的DNA虽然含量很少，但仍可以进行DNA指纹鉴定，因为在鉴定之前可通过获得大量的相同DNA。从上图可以判断出怀疑对象中最可能是罪犯。

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