第3节基因工程的应用知识点题库

对基因组文库的描述，不正确的是

A . 含有某种生物的全部基因 B . 基因中含有启动子和内含子 C . 文库的基因是通过受体菌承载的 D . 文库中的全部基因可以在物种间交流

下列关于转基因生物的研究，哪些属于限制条件
①重组 DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上
②对于大肠肝菌作为转基因受体的菌株，限定必须使用在37℃人体体温下死亡的菌株
③外源DNA不能产生对人体有毒害或过敏的蛋白质

A . ②③ B . ② C . ① D . ①②③

下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞(ES细胞)中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析不正确的是(　　)

A . 该过程使用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶 B . 完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物，必定是载体与棕褐毛基因形成的重组DNA分子 C . 第Ⅲ步操作后，还需经过筛选目的基因已成功转移的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中 D . 改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是细胞核中含有一整套的遗传物质

能够克服生物间远缘杂交不亲和性的生物技术可包括有（）
①基因工程②细胞工程③发酵工程④细胞融合⑤酶工程

A . ①②④ B . ①②④⑤ C . ①④⑤ D . ①②③④⑤

下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达

A . 显微镜下直接观察受体细胞中是否有含有目的基因 B . 在含相应抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌 C . 利用相应的DNA探针与受体细胞mRNA分子进行杂交 D . 提取受体细胞蛋白质，利用抗原—抗体特异性反应进行检测

下图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是

A . 获得该mRNA的最佳材料是受精卵 B . 构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌 C . 完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶 D . 探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌

将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是（）

A . 发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物 B . 大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传 C . 大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等 D . 生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶

基因治疗是指( )

A . 把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 B . 对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的 C . 运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变回复正常 D . 运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的

胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快，回答下列问题：

（1）在哺乳动物的核移植实验中，一般通过[ ]（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到[ ]阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内．

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行[ ]处理．另外，培养的卵母细胞需要发育至[ ]，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体．

（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是[ ]．

（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、[ ]、终止子、标记基因和复制原点等．目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的[ ]（填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是[ ]．

科研人员拟将已知的花色基因（目的基因）转人矮牵牛的核基因组中，培育新花色的矮牵牛．请回答：

（1）为了获得大量的目的基因，将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA，再与经（A．氯化钙 B．氯化钠 C．蔗糖 D．葡萄糖）处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA进人大肠杆菌．用的玻璃刮刀将稀释后的大肠杆菌液接种到含有抗生素的固体培养基上，经培养形成，再进行鉴定和扩大培养．
（2）从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA，用分别切割含目的基因的DNA和农杆菌的Ti质粒，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA并导入农杆菌．
（3）取田间矮牵牛的幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用70%浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用清洗，作为转基因的受体材料．
（4）将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基（含蔗糖、琼脂和抗生素，下同）上，使叶小叶先脱分化形成．再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至（A．LB培养基 B．MS培养基+适宜浓度NAA C．MS培养基+适宜浓度BA D．NAA/BA小于1的MS培养基）上生根，形成完整植株．
（5）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的等条件下进行炼苗．提取叶片组织的DN A，采用PCR技术目的基因，鉴定目的基因是否成功导入．
（6）为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的性状．

下列关于转基因植物的叙述，正确的是（　　）

A . 动物的生长激素基因转人植物后不能表达 B . 转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中 C . 转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 D . 如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题

如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解．请据图回答：

（1）步骤①用到的生物工程技术是．
（2）细胞③是囊胚的中分离得到的，在功能上具有，对该细胞进行定向诱导分化，通常需要加入，例如牛磺酸等．
（3）步骤④常用的方法是，这一步骤的操作对象如果是植物细胞，我国科学家独创的一种方法是．
（4）上述治疗方法在基因工程的水平上可以称为，基因治疗，也可以称为“治疗性克隆”，我国政府对此的态度是．

干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答：

（1）上图中进行的是(填“体内”或“体外”)基因治疗，①过程中利用的生物工程技术手段称为。若导入的干扰素基因序列为已知，则可通过获取。
（2） ES细胞是由囊胚中的分离出来的一类细胞，具有性，可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是。
（3）下列关于上述操作中的叙述，正确的是________。

A . ①②操作体现了上皮细胞具有全能性 B . ③过程可以用农杆菌转化法进行基因导入 C . 完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力 D . 基因治疗依据的变异原理是基因重组

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯徳毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资枓：

资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达（5′AOX1和3′AOXl（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子）。

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中已实现表达。

资料3:限制酶酶切位点

限制酶

SnaBⅠ

AvrⅡ

SacⅠ

BglⅡ

识别序

列及酶

切位点

↓

…TACGTA…

…ATGCAT…

↑

↓

…CCTAGG…

…GGATCC…

↑

↓

…CAGCTC…

…CTCGAG…

↑

↓

…AGATCT…

…TCTAGA…

↑

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应在图2中HBsAg基因两侧的A和B位置接上限制酶识别序列，这样可避免质粒和目的基因自身环化。
（2）用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒，导入大肠杆菌体内，目的是。
（3）为确认巴斯德毕赤酵母茵转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用方法进行检测。
（4）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
（5）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行并分泌到细胞外，便于提取。
（6）下图为HBsAg某DNA片段一条链的碱基排列顺序。其中图1的碱基排列顺序已经解读，其顺序是:GGTTATGCGT，请解读图2显示的碱基排列顺序：。

下列有关现代生物技术叙述，正确的是(　　)

A . 外源DNA需位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达 B . 进行动物细胞培养时定期更换培养液的目的是防止杂菌污染 C . 生产中通常取囊胚的内细胞团细胞做DNA分析进行性别鉴定 D . 改变脱氧核苷酸的序列就可以合成自然界中不存在的蛋白质

转基因生物现已成为人们争论的焦点之一，转基因奶牛和转基因抗虫水稻就是其中的典型例子。其获得过程如下，请回答相关问题：

（1） A→B→C为转基因奶牛的培育过程，其中A表示。②过程常用的方法是。其中④用到的主要胚胎工程技术有。
（2） A→B→D为转基因水稻的培育过程，在构建重组质粒B过程中，目的基因的两端还必须有和终止子；用含重组质粒的土壤农杆菌感染水稻细胞后，采用技术检测转基因水稻的染色体的DNA上是否插入了目的基因；若要确定BT毒蛋白基因导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，写出在个体水平上的鉴定过程：。
（3） ⑤过程所用的现代生物技术称为，水稻受体细胞通过⑤过程，能形成水稻植株的根本原因是此细胞具有。

红薯在我国已有400 多年的栽培历史了，它的产量高、用途广、适应性强，是我国重要的粮食和经济作物。但是，红薯在种植过程中会被病毒感染，导致产量降低，品种退化。

利用种苗脱毒技术是解决这个问题的有效途径。请回答下列问题：

（1）种苗脱毒过程常选取植物的作为外植体，在一定的和等条件下培养，最终获得不含病毒的幼苗。该技术的原理是。
（2）接种后一段时间，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是。
（3）利用植物组织培养技术还可制造出人工种子，即以等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
（4）植物组织培养技术还可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是（用流程图表示）。

为研究肝癌致病机理，科研工作者利用下图所示的差异杂交法和基因工程获取相关癌基因以作进一步研究。请据图回答问题：

图片_x0020_2055680217

（1）图 1 中，A 过程需要用酶，D 过程需要回收（填“未杂交”或“杂交分子”）的含 ³²P 的 cDNA 单链，继而通过人工合成，获得，并用其构建基因文库。
（2）分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环，其中检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是检测，若检测目的基因是否成功表达，则需用方法，该方法的原理是。
（3）上图 2 为改造后的目的基因。图 3 为两种质粒，其中 Ampr 为氨苄青霉素抗性基因，Tetr 为四环素抗性基因，lacZ 为蓝色显色基因，其表达产物可使底物 X-Gal 呈蓝色。EcoRⅠ（0.7Kb）、NotⅠ（1.2Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离（1kb=1000 个碱基对）。
①图 3 中能作为载体的最理想的质粒是（填“X”或“Y”），用选定的质粒与图 2 的目的基因构建基因表达载体时，应选用的限制酶是。

②若用 EcoRⅠ完全酶切上述①中获得的重组质粒，并进行电泳观察，可出现四种长度不同的片段，其长度分别为 1.7kb、5.3kb、。

图甲是几种限制酶识别序列及切割位点，图乙为某质粒的示意图，图丙是一段含有目的基因的DNA片段。请回答下列问题：

图片_x0020_100018

（1）基因工程中“分子手术刀”和“分子缝合针”分别是指。
（2）利用技术可以实现目的基因在体外大量扩增。
（3）基因工程中载体应具备的条件有：（答出两点即可）。
（4）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，含有重组质粒的大肠杆菌不能在含的培养基上生存。
（5）若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是。
（6）若用BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。

20世纪70年代，科学家创立了一种新的生物技术--基因工程，实施该工程的最终目的是（）

A . 定向提取生物体的DNA分子 B . 定向对DNA分子进行人工剪切 C . 在生物体外对DNA分子进行改造 D . 定向改造生物的遗传性状

第3节 基因工程的应用 知识点题库

第3节基因工程的应用知识点题库