第2节 动物细胞工程 知识点题库

（1） 过程①至②所获取的抗体1称为 ， 其中过程①是指细胞工程中的技术．

（2） ④过程需要酶，⑤过程则需要的工具酶为 ．

（3） ②处需要筛选，其培养基称为（液体培养基/选择培养基/鉴别培养基）．结构甲的组成必须包括启动子及目的基因等（写两项）．

（4） 如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过技术获得能产抗体的转基因棉花植株．

（1） 实验室已获得无限增殖调控基因（prG）．在体外，可采用技术大量扩增该目的基因．该技术的基本反应过程：目的基因DNA受热后解链为单链，与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行，如此重复循环多次．该技术的前提是要有，以便根据这一序列合成引物．

（2） 该基因工程操作的核心是．本研究中，受体细胞为，欲将目的基因转入受体细胞，常采用方法．若实验成功，则受体细胞既能，又能．

（3） 制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使细胞与细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的细胞．

（1） 下图为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图。

①苹果汁的制作中可利用果胶酶提高出汁率，果胶酶可以从黑曲霉、等微生物中获得。利用苹果酒制作苹果醋所需的微生物是。

②酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为而又有酶活性的制剂。图是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是。

A.实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用

B.为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌

C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行

D.固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱

③图中①过程为获得酒精含量和糖含量较高的苹果酒，需向果汁中添加。

④由图中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是。

（2） 科学家通过诱导黑鼠体细胞脱分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠。流程如下：

①从黑鼠体内获得一部分组织细胞，经过消化，使其分散成单个的细胞，然后放入（仪器）中保温培养。在培养过程中细胞保持生长、分裂（繁殖）乃至和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。

②下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是。

    A．二倍体细胞大多具有异倍体核型

    B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞

    C．细胞克隆的最基本要求是必须来源于单个细胞

    D．未经克隆化培养的细胞系细胞往往遗传性状不均一

③图中重组囊胚通过技术移入白鼠子宫内继续发育。为了提高成功率，代孕母鼠也需进行激素处理，使其。

（1） 整合有噬菌体DNA片段的CRISPR基因经产生RNA，此RNA与Cas蛋白共同构成CRISPR/Cas复合物，在此RNA的引导下，该复合物能定点切割对应的噬菌体DNA片段。由此分析，细菌中CRISPR/Cas系统的生理意义是。

（2） 通过改造此系统，可以实现对DNA的定点切割。在对不同基因进行定点切割时，应使用（填“相同”或“不同”）的RNA和Cas蛋白构成CRISPR/Cas系统。

（3） 科学家利用改造的CRISPR/Cas系统定点破坏绵羊胎儿成纤维细胞中的肌肉生长抑制基因，并用此细胞作为核供体，结合核移植技术，生产出新品种绵羊。
 ①在核移植时，应选用期卵母细胞进行去核操作。
 ②代孕绵羊对移入子宫内的外来胚胎基本不发生，这为重组胚胎在受体内的存活提供了可能。

（1） 体外培养动物细胞的条件有无菌无毒、营养条件、和。

（2） 若图1中A是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自动物体内的B细胞，促进d过程的常用诱导剂是。

（3） 利用图1制备单克隆抗体的方法中制备的原理是细胞膜流动性和。

（4） 若以细胞核移植技术制备单克隆抗体(图2)，a为去核的细胞，e是从d中分离出的胚胎干细胞，V过程类似于植物组织培养中的过程。

（5） 单克隆抗体作为诊断试剂的优点是。

（1） 将基因表达载体导入ES细胞的方法是，为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA，可采用技术。

（2） b过程可以获得更多的ES细胞，其采用的技术属于细胞工程中的技术。若要从早期胚胎中获得更多ES细胞，则可将早期胚胎培养至(时)期。

（3） 完成c、d过程的胚胎工程技术分别是、。若要培养试管动物，除以上两种技术外，还需要运用技术。

（4） 用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得产物，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。

（1） 在进行细胞培养之前,要对取自转基因奶牛的组织进行分离,形成单个细胞,这一过程中需要利用酶处理,不能用纤维素酶与果胶酶的原因是。 

（2） 形成重组细胞时应选用期的卵母细胞,去掉其细胞核的原因是。 

（3） 如果重组细胞为贴附性细胞,则在进行原代培养时,会表现出和等特点。 

（4） 重组细胞在培养液中培养成的重构胚移入受体母牛体内,会生出与供体奶牛遗传性状大致相同的犊牛,但某些性状上也会有差异,原因是。 

（5） 上图中所示的生物技术整体被称为。转基因奶牛的克隆成功,说明了动物具有全能性。 

（1） 下图所示转铁蛋白受体（TfR）与转铁蛋白（Tf）结合，通过胞吞方式，将铁元素运输至胞内。肿瘤细胞由于增长快速，需要更多的铁元素，因此肿瘤细胞表面TfR 表达量(上升或下降)。利用单克隆抗体技术，可研制相应的抗TfR抗体，它们与TfR特异性结合， 进而影响肿瘤细胞增长。

（2） 若想获得单克隆抗体，可将的小鼠的B 细胞与融合，继而筛选出的杂交瘤细胞，大量培养获得相应抗体，由于该抗体来源于小鼠，称为鼠源单克隆抗体。

（3） 将该鼠源单克隆抗体与人癌细胞混合后培养，发现单独使用抗体对人癌细胞的增殖无显著影响，可能的原因是抗体与细胞表面TfR结合后，为探究该假说成立与否，采用荧光标记定位的方法，结果发现抗体出现在细胞膜上和细胞内，则此实验结果支持该假说。

 

（4） 由于在本实验中单独使用抗体效果不佳，考虑利用抗体介导杀伤细胞对靶细胞的裂解作用来抑制癌细胞，该过程如图2所示。若无论何种抗体，杀伤细胞都可与之结合，最终使靶细胞裂解死亡，则说明抗体Fc段在不同种类的抗体中（相同或不同）。

（5） 人的杀伤细胞无法识别鼠源单克隆抗体的Fc段，科学家为此构建了人-鼠嵌合抗体。该过程基本流程排序为__________。

（1） 如图是以鲜葡萄汁为原料，制作葡萄酒和葡萄醋的过程，回答下列问题：

Ⅰ.若直接用洗净的红葡萄制作果酒，最后得到的葡萄酒呈红色，这是由于造成的，乙过程中使用的微生物是 ，制作葡萄醋需要向发酵罐提供。 

Ⅱ.乙中使用的微生物可以从食醋中分离纯化获得，操作如下：

①配制培养基。  

②灭菌。

③接种。接种时应在酒精灯附近进行，其目的是。通常法常用于对活菌进行计数，但其最终的统计结果却往往小于样液中的活菌数。

 ④培养。

Ⅲ.某研究小组发现一棵葡萄树具有抗虫抗旱的性状，欲用植物组织培养技术大规模繁殖具有该性状的幼苗，从而提高葡萄产量。接种前，需要对外植体进行消毒，先用浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗。实验过程中，愈伤组织在（A.LB培养基   B.MS培养基+适宜浓度NAA    C.MS  培养基+适宜浓度BA  D.MS培养基+适宜浓度BA+极少量的NAA）诱导分化成丛状苗，再转入生根培养基，形成完整植株。

（2） 近日根据最新发表的RNA序列分析显示，正在爆发的武汉新型冠状病毒的细胞表面受体是ACE2，与SARS病毒的细胞表面受体一样。下图是设想以小鼠为对象进行的单克隆抗体制备过程示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞，HAT培养基中最终只有杂交瘤细胞可以生长繁殖，请回答以下问题：

Ⅰ.过程1需给小鼠注射特定，以刺激小鼠产生相应抗体的B淋巴细胞。

Ⅱ.过程2中常用的生物诱导剂是。仅考虑细胞两两融合，融合形成的每种细胞染色体组数（（选填“相同”或“不同”）。

Ⅲ.过程3是抗体检测及阳性细胞的过程，整个抗体制备过程要进行次检测。

Ⅳ.单克隆抗体制备过程运用了和的动物细胞工程技术手段。产生的抗体比一般抗血清优越得多，原因。可为新型冠状病毒抗体研发提供重要的研发思路。