题目
受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶(PPO)和底物(酚类物质)直接接触,引起马铃薯的褐变。为探究温度对 PPO 活性的影响,实验小组进行如下实验:
(1)
PPO 粗提液的提取在 (填“低温”或“高温”)条件下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取 20g
样品放入含 50mL 磷酸缓冲液(pH 值为 5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心、上清液即为 PPO 的粗提液,加缓冲液研磨的目的是。
(2)
不同温度下 PPO 活性的测定
步骤顺序
试管 1
试管 2
试管 3
试管 4
试管 5
试管 6
试管 7
试管 8
PPO 粗提液
2mL
2mL
2mL
2mL
酚类底物
2mL
2mL
2mL
2mL
反应
混合振荡
混合振荡
混合振荡
混合振荡
温度预处理
(5min)0℃
15℃
30℃
45℃
保温时间
5min
5min
5min
5min
记录结果
+
++++
++++
++
(注:反应底物充足;实验结果中“+”越多褐色越深)
①实验步骤顺序有不妥之处,请改正。
②实验结果表明:15℃和 30℃温度条件,PPO 具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是。
③为进一步探究 PPO 最适温度,应在范围内设置温度梯度。
(3)
在温度 30℃的条件下,取等量提取液分别加到四支盛有等量过氧化氢溶液、pH 分别为 3、5、7、9 的试管中,结果发现每一支试管都产生气体。请回答:
①该实验的课题是:。
②各实验组均在
30℃下进行的原因是:a;b。
答案: 【1】低温【2】保持 PPO 的活性(防止 PPO 失活)
【1】①“反应”步骤改在“温度预处理”之后【2】②在酶的最适温度前后,可以有相同的催化效率【3】③15℃∼30℃
【1】探究不同 pH 对过氧化氢酶活性的影响【2】② 30℃是过氧化氢酶作用的适宜温度【3】排除温度变化(无关变量)对实验结果的影响