题目

火龙果味道清甜、口感嫩滑，具有极高的营养价值、经济价值，深受广大消费者的青睐。多年来，火龙果采摘后腐烂的问题一直是影响其生产发展的重大问题，被侵染的部位主要是火龙果的茎，严重时就会侵染到果实。某实验小组欲对火龙果致腐微生物菌株进行分离与纯化，步骤如下，回答下列问题： （1） 火龙果致腐微生物菌株分离与纯化 称取25g自然条件下完全腐烂的红心火龙果，置于225mL无菌生理盐水中，振荡30min，取1mL稀释6个梯度（101~106倍稀释），分别涂布于固体平板上，该接种方法称为，再将平板置于28℃条件下培养1～7d，挑取不同形态的单菌落分别在试管中培养，置于临时保存。 （2） 致腐菌回接火龙果实验 用酒精擦拭火龙果表面，其目的是。将不同的致腐菌依次制成菌液，将其回接到新鲜无腐烂红心火龙果上，同时以为对照组，晾干后置于室温条件下储藏，每隔3d进行观察和记录，最终选取致腐能力强的致腐菌，且培养成菌落。 （3） 致腐菌鉴定 对筛选得到的致腐菌的菌落初步从（答出2点）等方面进行形态学鉴定，之后利用分子生物学、生物信息学等分析方法进行鉴定后，发现一类是青霉属中的扩展青霉，另一类是附球属中的黑附球菌。扩展青霉和黑附球菌细胞结构的显著区别在于。 （4） 拮抗实验：研究发现，解淀粉芽孢杆菌上清液对青霉菌株有一定的拮抗抑制作用，为探究最佳拮抗浓度，请写出实验思路：。 答案： 【1】稀释涂布平板法【2】4℃的冰箱中 【1】消毒【2】将等量无菌水回接到火龙果上 【1】形状，大小，隆起程度和颜色【2】扩展青霉是真核生物，存在细胞核；黑附球菌是原核生物，无细胞核 【1】取等量系列浓度梯度的解淀粉芽孢杆菌上清液分别覆盖到含青霉菌的固体培养基中，观察抑菌圈的大小（抑制青霉菌生长的情况）

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