题目

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄．请据图1回答： （1） 提取目的基因 ①若已获取PG的mRNA，可通过获取PG基因．②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有结合位点．得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端．已知BamHI的识别序列如图2﹣甲所示，请在如图2﹣乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端．③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是． （2） 用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入．培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞现象来鉴别细胞壁是否再生． （3） 由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与互补结合，抑制PG基因的正常表达．若转基因番茄的保质期比非转基因番茄，则可确定转基因番茄成功． （4） 获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用方法使子代保持转基因的优良性状． 答案： 【1】逆转录（或cDNA文库）【2】RNA聚合酶【3】大量复制目的基因（克隆目的基因） 【1】卡那霉素【2】植物激素（生长素和细胞分裂素）【3】是否发生质壁分离 【1】天然PG基因转录的Mrna【2】长 【1】植物组织培养

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