题目

回答下列（1）、（2）小题：   （1） 回答与黄酒制作有关的问题： 氨基甲酸乙酯（EC）作为一种潜在致癌物，广泛的存在于发酵食品和酒精饮料中。在各种发酵酒中，黄酒面临的EC超标问题更为突出，利用酸性脲酶消除其前体物质尿素被认为是最为有效的一种方法。 ①获取含有酸性脉酶菌的土样，加入制备成土壤悬液，并对土壤悬液中的酸性脲酶菌进行扩大培养。从适合使用的角度分析，该酸性脲酶菌应对富含的发酵液有很好的耐受性。 ②常用于分离菌种的方法是，经过酸性培养基的初筛培养后，还要在添加酚红的中性固体培养基上进行复筛，应该挑选（填“有红色圈的菌落”或“无红色圈的菌落"）为目标菌株，最后将其接种在中，4℃冰箱中保藏。  ③酸性脲酶菌的产酶能力受到许多因素影响，除培养基的营养成分、温度、pH外，在摇床培养时还应考虑。从酸性脲酶菌中提取脲酶，需要经过、取上清液等步骤获得粗酶提取液，进一步纯化后制备成固定化酶。若发酵液在一次流经酸性脲酶凝胶反应柱后，尿素含量仍高于产品标准，在不增加柱高的前提下，还可以通过措施来改进生产工艺流程。 （2） 烟草花叶病毒是导致烟草生产经济损失的主要病毒，造成的产量损失可达50%～70%。常利用植物细胞工程技术培育烟草品系来解决病毒感染问题。 ①为控制病毒感染，可取部位进行植物组织培养获得脱毒苗，原因是。 ②为了获得烟草花叶病毒的外壳蛋白基因（一种抗病毒基因），先要分离得到烟草花叶病毒的外壳蛋白，分析该蛋白质的氨基酸序列和相应的核苷酸序列，再利用获得该目的基因。依据基因工程原理，用对含抗病毒基因的DNA片段和Ti质粒进行处理，使它们的两端产生不同的黏性末端，从而避免基因片段自连接，获得更多适用的。 ③用含有抗病毒基因的农杆菌侵染烟草带有伤口的叶片时，通过调控（写出一点），可提高转化效率。为检验抗病毒基因是否转入成功，从分子水平上可通过检测；从个体水平上可检测。  答案： 【1】无菌水【2】尿素【3】稀释涂布平板法和平板划线法【4】有红色圈的菌落【5】固体斜面培养基【6】摇床的转速，培养的时间【7】振荡、离心【8】减慢流速、多次流入 【1】茎尖或芽尖【2】植物分生区附近的病毒极少，甚至无病毒【3】化学合成【4】不同的限制性核酸内切酶对含目的基因的DNA片段和质粒进行处理【5】基因表达载体【6】农杆菌的浓度和侵染时间【7】DNA分子杂交法【8】是否具有抗病毒的特征

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