题目

普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下。请分析回答： （1）①和②过程中所用的限制性内切酶分别是____________________、____________________。 （2）基因表达载体除了图示组成外，至少还有____________________等（至少答两个）。 （3）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是____________________和____________________。 （4）④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中，整合到棉花细胞染色体DNA的区段是____________________，转化后的细胞再通过____________________形成植物体。 （5）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是____________________。 答案：【参考答案】 （1）HindⅢ、BamHⅠ   SmaⅠ（2）复制原点、终止子、标记基因等（3）6.0kb  12.7kb （4）（含有E6启动子和GhMnaA2基因的）T－DNA     植物组织培养 （5）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纤维更长

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