题目

为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导人油菜细胞并获得了转基因油菜品种．（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用 法从陆地棉基因文库中获取酶D基因．从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．所含三种限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的切点如图所示．则用 和 酶处理两个基因后，可得到  （填图中字母）端相连的融合基因．（2）将上述融合基因插入如图所示质粒的T﹣DNA中．构建 并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含 的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用 培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．（3）剪取油菜的叶片放入染液中一段时间，此过程的目的是  ． 进一步筛选后获得转获因油菜细胞．该细胞通过 技术．可培育成转基因油菜植株．（4）提取上述转基因油菜的mRNA．在逆转录酶的作用下获得cDNA．再依据 的DNA片段设计引物进行扩增．对扩增结果进行检侧．可判断融合是否完成  ． （5）用 法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达． 答案：【1】PCR【2】ClaⅠ【3】DNA连接【4】A、D【5】基因表达载体（或重组质粒）【6】四环素【7】液体【8】利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞【9】植物组织培养【10】融合基因【11】转录【12】抗原﹣抗体杂交

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