题目

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理．PCR扩增过程示意图如图，请回答下列问题： （1） 从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过获得用于PCR扩增． （2） 设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的位点．设计引物时需要避免引物之间形成，而造成引物自连． （3） 图中步骤1代表，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环． （4） PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键．退火温度过高会破坏的碱基配对．退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定更高的退火温度． （5） 如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物）． 答案： 【1】逆转录【2】cDNA 【1】限制性核酸内切酶【2】碱基互补配对 【1】变性 【1】引物与模板【2】GC含量高 【1】②③

查看本题答案和解析