题目

甜菜碱是某些植物主要的渗透压调节物质。甜菜碱醛脱氢酶（BADH）是合成甜菜碱的关键酶。 BADH 基因的表达可以增加细胞中甜菜碱含量从而增强植物的耐盐性。许多农作物如水稻、土豆等自身不能积累甜菜碱，科学家利用基因工程将甜菜碱合成的相关基因转入水稻中，在不同程度上提高了水稻的耐盐性。如图是利用 PCR技术获取目的基因的示意图，回答下列问题： （1） 山菠菜是耐盐碱植物，若要获得 BADH 基因的cDNA，最好从山菠菜植株（器官）部细胞中提取转录产物并经过过程即可获得。 （2） 利用图示 PCR技术扩增 BADH 基因时，在缓冲液中除了要添加模板和引物外，还需要加的物质有；至少经过轮循环可得到仅含所需 BADH 基因的片段，一个 BADH 基因经过4轮循环，共需引物个。 （3） 构建 BADH 基因表达载体时，除目的基因外还需要（至少写两个）；将构建的基因表达载体通过农杆菌导入到水稻细胞之前，还需要用氯化钙处理农杆菌，这样做的目的是。 （4） 欲鉴定转基因耐盐水稻是否培育成功，在个体水平上进行鉴定的方法是。 答案： 【1】根【2】逆（反）转录 【1】Taq酶（热稳定DNA 聚合酶）和四种脱氧核苷酸【2】3【3】30 【1】启动子、终止子、标记基因等【2】使农杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA 分子的生理状态，即感受态 【1】将转基因水稻植株和非转基因水稻植株置于含不同浓度 NaC1溶液的完全培养液中培养，观察其生长状况

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