题目

刍草是玉米是原始祖先，具有较强的抗病抗逆特性，为玉米育种提供了原始的遗传材料。研究发现大刍草基因组中有一个D基因仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究D基因表达对卵细胞的影响，设计了实验。据图回答： （1） D基因在大刍草卵细胞中不转录，从基因结构角度推测其可能的原因是卵细胞中。 （2） 要构建大刍草的CDNA文库，应从大刍草中提取总RNA，原因是。由总RNA在相关酶的作用下获得D基因编码蛋白的序列。按如图所示构建重组表达载体。 （3） 在过程①、②转化筛选时，过程中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上。 （4） 从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下大刍草卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明。 （5） 在大刍草基因组中发现另一个B基因与其育性相关，为进一步研究B基因的功能，研究者将一段T-DNA插入到B基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为b，现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验，统计母本植株的结实率，结果如表所示： 杂交编号 亲本组合 结实率 a ♀BB×♂bb 0.1 b ♀bb×♂BB 0.5 c ♀BB×♂BB 0.5 ①表中数据表明B基因失活后使配子育性降低。 ②让杂交a的F1给杂交b的F1授粉，得到F2。为验证F2植株的基因型，研究者据B基因、T-DNA的序列设计了3种引物，如图所示： 随机选取F2植株若干，提取各植株的总DNA，分别用“引物I+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR，检测是否能扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR扩增） 如果引物“I+Ⅲ”组及“Ⅱ+Ⅲ”组进行PCR均可完成扩增，则相应植株的基因型为。 如果，则相应植株的基因型为BB。 答案： 【1】D基因的启动子无法启动转录 【1】体细胞或精子【2】D基因仅在大刍草的体细胞和精子中正常表达 【1】② 【1】D基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚 【1】雄【2】Bb【3】仅引物“Ⅱ＋Ⅲ”组进行 PCR 能完成扩增，而“Ⅰ＋Ⅲ”组不能完成扩增

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