题目

使用胰岛素能有预防肾脏移植后糖尿病的发生，但同时也会降低患者的免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性。为验证胰岛素会降低免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性，根据提供的实验材料，完善实验思路，预测实验结里，并进行分析与讨论。实验材料：PBMC细胞悬液（人外周血单个核细胞，主要是淋巴细胞和单核细胞）、细胞培养液、一系列不同浓度的环孢素、胰岛素、S961、锥形瓶等。（要求与说明：免疫抑制剂的作用程度可用半致死量IC50表示、即在规定时间内一半免疫细胞死亡时使用的免疫抑制剂浓度，环孢素是一种免疫抑制剂，S961是一种胰岛素受体拮抗剂；实验中涉及的剂量不作具体要求：实验条件适宜） （1） 完善实验思路：①取锥形瓶若干，随即均分成4组，编号为A、B、C、D，分别加入等量适量PBMC细胞悬液和细胞培养液，用MTT法检测各组活细胞数量并记录。A组：加入适量细胞培养液；B组：加入等量适宜浓度的胰岛素溶液；C组：加入，作为对照；D组：加入。②按上述分组加入相应试剂后。将培养瓶放入CO2恒温培养箱中培养96h，用MTT法检测各组活细胞数量并记录，计算C、D组的，并得出C、D组环孢素的IC50． （2） 预测实验结果：完善下列必标图。并用曲线表示C、D组的实验结果。 （3） ①患者肾脏移植后，须使用免疫抑制剂的原因是。②若实验中A、B组的细胞存活情况相同，说明。③进一步研究发现PBMC细胞中的表达量增加，说明胰岛素可能是直接作用于免疫细胞，提高了其活性。为了证明此作用，可增加一组实验组，该组的处理是。 答案： 【1】等量一系列不同浓度的环孢素【2】等量胰岛素和一系列不同浓度的环孢素【3】细胞存活率 【1】 【1】免疫抑制剂能降低免疫系统对移植器官的排斥，提高移植器官的存活率【2】说明外源胰岛素对PBMC细胞无毒性【3】胰岛素受体【4】胰岛素+环孢素D组IC50+S961

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