题目

基因工程在农业中的应用发展迅速，基因可导入农作物中，用于改良该农作物的性状．通过多重PCR技术可扩增并检测转基因农作物的外源基因成分．多重PCR是在一个PCR反应体系中加入多对引物，针对多个DNA模板或同一模板的不同区域，扩增多个目的基因的PCR 技术．请回答： （1） 我国科学家将Bt毒蛋白基因、鱼的抗冻蛋白基因、控制果实成熟的基因导入农作物，可获得、、延熟的转基因作物． （2） 引物是根据的一段核苷酸序列合成的，每种基因扩增需要一对引物的原因是．表是A、B、C三种基因的引物，据表分析，引物特异性主要体现在． A基因引物15′GCTCCTACAAATGCCATCATTGC3′引物25′GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC3′B基因引物15′TGAATCCTGTTGCCGGTCTT3′引物25′AAATGTATAATTGCGGGACTCTAATC3′C基因引物15′CCTTCATGTTCGGCGGTCTCG3′引物25′GCGTCATGATCGGCTCGATG3′ （3） PCR过程中温度从90℃降到55﹣60℃的目的是． （4） 检测人员通过多重PCR技术确定农作物中是否含有A、B、C三种转基因．将A、B、C三种基因和待测的农作物基因样品进行PCR，扩增后的产物再进行电泳，结果如图．据图分析：含有三种转基因的农作物是，判断依据是． （5） 与PCR技术相比，多重PCR技术的优势是 答案： 【1】抗虫【2】抗冻 【1】已知目的基因【2】需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是不互补的，否则会形成引物二聚体，进而影响目的基因的扩增【3】引物特异性是引物中特定的碱基序列， C+GA+T 可以体现的特异性 【1】加热至90～95℃利于DNA解链；冷却到55～60℃，利于引物结合到互补DNA链． 【1】4【2】PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段，1组为已知A、B、C三种基因的对照，其中4含有A基因、B基因和C基因，但2只含有A基因和C基因，3不含有这三种基因 【1】a、确保所有的靶位点可以用相同的PCR程序在单个反应中得到有效的扩增．b、在使用相同的PCR程序和反应条件的单个PCR中对每对引物的量进行优化，以达到最大的扩增效率．c、平衡多重PCR中每对引物的量，使之对每个靶点都能获得足够的扩增量．

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