题目
下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素 抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题: (1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有_____________和_______________,构建重组质粒时需要的工具酶有_______________,对获取的目的基因可用_______________技术对其扩增。 (2)实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了____________________。若大肠杆菌菌落显白色,说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌________________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。 (3)将若干个质粒和目的基因用BamH I和Blg II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为____________kb(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
答案:(1)X—gal(2分)氨苄青霉素(2分) 限制酶、DNA连接酶(2分) PCR (多聚酶链式反应)(1分) (2)没有目的基因的空质粒(2分) 重组质粒(2分) 不能(2分) (3)1.8(2 分)