题目

现代生物技术在医药领域有广泛应用。将人体中B蛋白基因导入大肠杆菌，以生产药物B蛋白。回答下列问题： （1）将B蛋白基因导入大肠杆菌，不能直接从人类基因文库中获取B蛋白基因，原因是                                 。       （2）为获取B蛋白基因，需要在人体细胞内提取的         经逆转录形成cDNA，cDNA中_______（填“含有”或“不含”）内含子序列。利用PCR技术扩增目的基因时，a和b表示两种引物，这两种引物的碱基序列不能互补，原因是                            。 （3）导入过程所用载体pUC19质粒如图所示，LacZ基因表达产物能水解X-gal，使菌落呈蓝色，不能水解X-gal的菌落呈白色。已知三种限制性核酸内切酶X、Y、Z所识别的序列分别是C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC（↓表示剪切点）。为便于筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应选用__________酶将该质粒与目的基因构建为重组质粒，并且在培养基中加入________，接种培养后选择________色菌落。 （4）筛选得到成功导入B蛋白基因的大肠杆菌菌株，为检验B蛋白基因是否表达，可以用含放射性标记的B蛋白基因单链作为探针，检测受体菌有无__________。 答案：（1）人体基因的转录初始产物需切除部分序列，才能加工成为成熟的mRNA，大肠杆菌没有内质网，B蛋白基因无法正常表达       （2）mRNA   不含     a和b引物若能互补会发生配对，从而会减弱与目的基因的结合        （3）酶Y和DNA连接酶    氨苄青霉素、X-gal（写全给分）    白    （4）成功转录（合成相应RNA）

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