题目

抗体分子含有两条短肽和两条长肽链，科研人员将小鼠编码抗体（抗禽流感病毒HA抗原）可变区的基因片段与人编码抗体恒定区的基因片段整合，构建图1所示表达载体（HindⅢ等表示不同限制酶的切割位点），导入中国仓鼠卵巢细胞后，筛选能够稳定表达的细胞株，成功获得大量嵌合抗体（图2）。 请根据资料回答下列问题： （1） 为构建人鼠嵌合抗体基因表达载体，需要对编码抗体不同片段的基因进行重组，为此应该从分泌鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取，经逆转录得到用于PCR扩增，并分别与人抗体的恒定区DNA序列拼接。 （2） 在PCR反应体系中需加入模板、4种脱氧核苷酸（4种dNTP）、、及缓冲液等。 （3） 构建人-鼠嵌合基因表达载体时，先将人抗体的轻、重链基因部分序列分别与相应鼠抗体的可变区序列整合后插入到两个启动子的下游。这过程需要将鼠抗体长链基因经和双酶切，鼠抗体短链基因经和双酶切。①是识别和结合的部位，它可以驱动相关基因转录。 （4） 将重组质粒导人中国仓鼠卵巢细胞后，可采用技术检验基因是否成功转录。通过基因工程技术成功表达并组装出有生物学活性的嵌合抗体，该嵌合抗体的优点是。 答案： 【1】鼠抗体mRNA（或mRNA，鼠抗体可变区mRNA）【2】鼠抗体cDNA（或cDNA，鼠抗体可变区cDNA） 【1】Taq酶（热稳定DNA聚合酶）【2】引物 【1】HindⅢ【2】KpnⅠ【3】BamH I【4】EcoR V【5】RNA聚合酶 【1】分子杂交【2】减少发生免疫反应的可能

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