题目

由于“人一人杂交瘤技术”存在杂交瘤细胞体外传代不稳定、抗体亲合力低等缺陷，目前单克隆抗体大多是鼠源性的，应用于人体治疗时存在诸多问题。科学家通过基因工程技术，可以最大程度降低抗体的鼠源性，降低甚至消除人体对抗体的排斥反应。回答下列问题：（1）从经过抗原免疫个体的______细胞中提取mRNA，通过______方法获取目的基因。将目的基因在体外大量扩增可以采用______技术。（2）为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接，在切割目的基因和质粒时，应该注意______。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程，可以采用______处理受体菌。（3）检测受体细胞是否合成抗体的方法是______。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比，最突出的优点是______。 答案：【答案】浆 逆转录 PCR 使用不同限制酶切割目的基因与质粒 CaCl2 抗原-抗体杂交 不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应 【解析】基因工程的操作步骤：目的基因的获取、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。（1）获取制备单克隆抗体的目的基因，可以从经过抗原免疫个体的浆细胞中提取mRNA，然后通过逆转录的方法获得DNA，将目的基因在体外大量扩增可以采用PCR技术。（2）为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接，在切割目的基因和质粒时，应该注意使用不同限制酶切割目的基因与质粒。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程，可以采用CaCl2 处理受体菌。 （3）检测受体细胞是否合成抗体的方法是抗原-抗体杂交。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比，最突出的优点是不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应

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