题目

聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：（1）下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方，X物质最可能为__________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显__________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具由筛选作用。成分MgSO4蛋白质PVA溶液水X物质用量5g10g1 000mL7g20g （2）若将100ml含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1ml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100ml原菌液中有PVA分解菌__个，该方法的测量值与实际值相比一般会__________（填“偏大”“偏小”或“相等”）。（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入__________，用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：__________________________________________________。（4）对于挑选出的PVA分解菌，应当接种在__________培养基上培养，长成菌落后，置于_______℃冰箱中做临时保藏。若要长期保藏，则需采用__________法。 答案：【答案】 琼脂 多于 1.6×109 偏小 碘 配置相同PVA浓度的培养基来培养不同菌株，一定时间后通过测定白色透明圈大小来确定不同菌株降解PVA能力的大小 固体斜面 4 甘油管藏【解析】本题考查微生物的培养和分离、计数的知识点，解题要点是识记微生物培养中培养基的配制方法，培养基的种类及功能，掌握微生物的分离和计数方法的计算。（1）分析题意可知，表格是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，应该是固体培养基，所以X物质最可能是琼脂；由于完全培养液中任何微生物都可以生长，因此对照组培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。（2）若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌=160÷0.1×104×100=1.6×109个；由于两个或多个细菌聚集在一起只能产生一个菌落，因此该方法的测量值与实际值相比一般会偏小。（3）根据题意可知，“PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑”，因此要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，可在培养PVA分解菌的培养基中加入碘用于鉴别PVA分解菌；若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，可以用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定白色透明斑的大小（或直径）来确定不同菌株降解PVA能力的大小。（4）对于挑选出的PVA分解菌，应当接种在固体斜面培养基上培养，长成菌落后，置于4℃冰箱中做临时保藏。若要长期保藏，则需采用甘油管藏法。[点睛]：本题中的易混点有：1.本实验所用的是选择培养基，是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。2. 微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等常用固体培养基，常用的凝固剂是琼脂。

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