题目

胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：(1)用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA作___________，然后在___________的作用下合成胰岛素基因。(2)利用PCR技术扩增胰岛素基因前根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成___________，扩增后的胰岛素基因不能直接导人大肠杆菌体内的原因是____________________________________________。(3)利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素的核心是______________________，基因工程中的转化是指_________________________________的过程。将重组胰岛素基因导入大肠杆菌内，最常用的转化方法是______________________。 答案：【答案】模板 逆转录酶 引物 胰岛素基因无复制原点，无表达所需的启动子、终止子 构建基因表达载体 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达 感受态细胞法（或Ca2处理法） 【解析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。转化指的是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（1）用基因工程方法生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA，以其作为模板，在逆转录酶的作用下合成DNA，该过程获得的目的基因不含非编码区和内含子等。（2）利用PCR技术扩增胰岛素基因前根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，由（1）过程获得的目的基因不含非编码区和内含子等，因此扩增后的胰岛素基因无复制原点，无表达所需的启动子、终止子，不能直接导入大肠杆菌体内。（3）利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素的核心是构建基因表达载体，基因工程中的转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。将重组胰岛素基因导入大肠杆菌内，最常用的转化方法是感受态细胞法。

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