题目

回答下列问题：酵母菌是一种兼性厌氧型的真菌，在工业生产中具有重要的用途。(1)用培养基培养微生物时，除考虑各种营养条件外，还要考虑_________和渗透压等条件（至少写两个），并进行________灭菌。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即___________和___________。从物理状态来看，应属于___________培养基。(3)将接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置,原因是____________。(4)在对酵母菌的扩大培养过程中，为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经台盼蓝染液（体积忽略不计）染色，用25×16型血细胞计数板（体积为0.1mm3）计数5个中格中的细胞数，理论上_____色细胞的个数应不少于_____，才能达到每毫升4×109个活细胞的预期密度。 答案：【答案】温度、pH、氧气、无菌等 高压蒸汽（湿热） 平板划线法 稀释涂布平板法 固体 防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染 无 80 【解析】微生物生长繁殖的条件有：①充足的营养；②适宜的温度；③合适的酸碱度；④必要的其他环境；⑤无菌的条件；⑥适宜的渗透压等(1)根据分析可知，用培养基培养微生物时，需要有机营养和无机营养，还要考虑温度、pH、氧气、无菌和渗透压等条件，并进行高压蒸汽（湿热）灭菌。(2)稀释涂布平板法和平板划线法是纯化菌种时，得到单菌落，常采用的两种接种方法。从物理状态来看，应属于固体培养基。(3)为了防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，因此将接种后的平板置于培养箱中培养时需要倒置。(4)活细胞不能被染色，因此统计的是无色细胞，25×16型血细胞计数板（体积为0.1mm3）计数5个中格中的细胞数，则计数板的体积为0.1÷103=10-4mL，计数板共有400个小格，25个中格，则5个中格有80个小格，稀释倍数为1000。假设5个中格中的无色细胞的个数为n个，其计算方法为：4×109=（n/80）×（400/10-4）×103，n=80个。

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