题目

纤维素分解菌对于环境治理和废弃物的资源化开发利用具有重大意义。研究人员从富含腐殖质的土壤样品中筛选出高效纤维素分解菌并测定其纤维素分解能力。请回答下列问题。(l)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上，培养基中加入的KH2P04和Na2HP04的作用有____（答出两点即可）。(2)经选择培养后的样品需接种在___的培养基上培养，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____。为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中l块平板的各划线区均未见菌落生长，最可能的原因是____。(3)刚果红可以与纤维素形成____色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员将菌液接种在刚果红培养基平板中培养，长出菌落后出现大小不同的透明圈，透明圈的大小与纤维素酶的____有关，应选择____的菌落即为分解纤维素能力最强的菌株。(4)为确定得到的是纤维素分解菌，需进行发酵产纤维素酶的实验。可采用对纤维素酶分解滤纸后产生____进行定量的测定。 答案：【答案】纤维素 为纤维素分解菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定 鉴别纤维素分解菌 检测培养基平板灭菌是否合格 接种环温度过高，纤维素分解菌被杀死 红色 量与活性 透明圈与菌落直径的比值最大 葡萄糖 【解析】选择培养基是根据不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同而配制的。不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同，利用这些特点，我们便可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基，例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；根据对营养物质的特殊的需求，可以选择不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纤维素分解菌的碳源是纤维素。若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入刚果红，观察培养基中出现的以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。（1）由于纤维素分解菌能利用纤维素作为碳源，而其它微生物则不能，故可将土壤样品稀释液接种于以纤维素为唯一碳源的固体培养基上。培养基中加入的KH2P04和Na2HP04的作用有：为纤维素分解菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。（2）经选择培养后的样品经过梯度稀释后接种在鉴别纤维素分解菌的培养基上培养，以进一步计数纤维素分解菌。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格。挑取了相同的菌落在3块相同平板上划线，结果其中l块平板的各划线区均未见菌落生长，最可能的原因是接种环温度过高，纤维素分解菌被杀死。（3）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。故可根据菌落周围是否形成透明圈可确定是否为纤维素分解菌。其中透明圈的大小与纤维素酶的量和活性有关，透明圈与菌落直径的比值最大的，说明该菌落为分解纤维素能力最强的菌株形成的。（4）为确定得到的是纤维素分解菌，需进行发酵产纤维素酶的实验。可采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定

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