题目

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。   据图回答： (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________________________________________________________________________ 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。 A．启动子　　　　　　 B．tetR C．复制原点    D．ampR (3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。 A．农杆菌转化      B．大肠杆菌转化 C．显微注射    D．细胞融合 (4)过程②采用的生物技术是________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。 A．核酸分子杂交    B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交     D．PCR   答案： (1)HindⅢ和BamHⅠ　氨苄青霉素 (2)A (3)C (4)胚胎移植技术 (5)全能 (6)C   载体上不含SmaⅠ限制酶的酶切位点，若用SmaⅠ酶切目的基因，则无法与载体连接。因为四环素抗性基因在酶切后被破坏，所以只能用氨苄青霉素进行筛选。启动子可启动基因的转录过程。动物细胞常用显微注射法导入重组载体。要检测基因是否成功表达，需检测人乳铁蛋白是否合成，所以需采用抗原—抗体杂交技术。  

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